本发明提供了一种来源于土壤宏基因文库的阿魏酸酯酶基因，其核苷酸序列和氨基酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。
将该酯酶基因插入到质粒pET‑28a(+)后，转化至大肠杆菌BL21(DE3)中实现异源表达。
纯化后的重组酶(BDS4)分子量为38.8kDa。
此外，本发明首次提出新型阿魏酸酯酶可以水解邻苯二甲酸二甲酯，邻苯二甲酸二乙酯，邻苯二甲酸二丁酯等多种塑化剂。
定点诱变实验表明BDS4的催化三联体由丝氨酸(S158)，天冬氨酸(D256)和组氨酸(H286)组成，三者中任何氨基酸的突变都会导致BDS4失去催化能力。
在木聚糖酶的存在下，BDS4可明显提高从去淀粉麦麸中释放阿魏酸的量。
本发明的新型阿魏酸酯酶，由于其特有的活性及酶学特性，使其可应用于饲料、造纸、食品、制药等领域。

辛志宏 吴盛露 姜俊伟 张月琦 南放 乔贝贝 邱佳容 李珊

南京农业大学

211225 江苏省南京市溧水区白马镇国家农业科技园南京农业大学基地

本发明提供了一种来源于土壤宏基因文库的阿魏酸酯酶基因，其核苷酸序列和氨基酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。
将该酯酶基因插入到质粒pET‑28a(+)后，转化至大肠杆菌BL21(DE3)中实现异源表达。
纯化后的重组酶(BDS4)分子量为38.8kDa。
此外，本发明首次提出新型阿魏酸酯酶可以水解邻苯二甲酸二甲酯，邻苯二甲酸二乙酯，邻苯二甲酸二丁酯等多种塑化剂。
定点诱变实验表明BDS4的催化三联体由丝氨酸(S158)，天冬氨酸(D256)和组氨酸(H286)组成，三者中任何氨基酸的突变都会导致BDS4失去催化能力。
在木聚糖酶的存在下，BDS4可明显提高从去淀粉麦麸中释放阿魏酸的量。
本发明的新型阿魏酸酯酶，由于其特有的活性及酶学特性，使其可应用于饲料、造纸、食品、制药等领域。