本发明公开了一种转录激活样效应子的模块组装方法,属于基因组工程领域。
所述组装方法具体如下:基于UA法,在TALEs自然单元模块序列的基础上设计了一种新的人工单元模块序列,命名为偏单元(或X单元)。
在其两端引入XbaI和NheI同尾酶识别位点的同时,于RVD区上游独特的引入了AsiSI限制性内切酶位点,构成XbaI‑AsiSI‑NheI偏单元(X单元)。
同尾酶的引入便于克隆连接,而AsiSI酶切位点的引入则使基础一单元的构建,及后续的定向克隆更加容易,提高克隆效率。
该组装法适用于TALEN、mtTALEN等技术中的模块定向组装,简便易行,具有普遍适用性。
建立了一种转录激活样效应子的模块组装方法。
聂凌云 高敬 魏迪 段仰苗 池振奋 程东庆 聂凌虎
聂凌云
100071 北京市丰台区丰台西路17号
本发明公开了一种转录激活样效应子的模块组装方法,属于基因组工程领域。
所述组装方法具体如下:基于UA法,在TALEs自然单元模块序列的基础上设计了一种新的人工单元模块序列,命名为偏单元(或X单元)。
在其两端引入XbaI和NheI同尾酶识别位点的同时,于RVD区上游独特的引入了AsiSI限制性内切酶位点,构成XbaI‑AsiSI‑NheI偏单元(X单元)。
同尾酶的引入便于克隆连接,而AsiSI酶切位点的引入则使基础一单元的构建,及后续的定向克隆更加容易,提高克隆效率。
该组装法适用于TALEN、mtTALEN等技术中的模块定向组装,简便易行,具有普遍适用性。
建立了一种转录激活样效应子的模块组装方法。