本发明涉及测序文库构建中5’和3’接头连接副产物的去除方法。
具体而言，本发明提供一种切割RNA‑DNA：cDNA杂交双链体的方法，所述方法包括混合Cas酶、sgRNA和所述RNA‑DNA：cDNA杂交双链体的步骤；其中，该杂交双链体中的DNA部分包含该Cas酶识别的前间区序列邻近基序(PAM序列)；该sgRNA能特异性结合该cDNA链的一部分；和该Cas酶能特异性识别该sgRNA，并切割所述杂交双链体；任选地，所述RNA‑DNA：cDNA杂交双链体产生于RNA测序文库的构建过程中；以及任选地，所述RNA为RNA测序文库构建过程中使用的5’接头，所述DNA为RNA测序文库构建过程中使用的3’接头。

吴立刚 杨其元

中国科学院分子细胞科学卓越创新中心

200031 上海市徐汇区岳阳路320号35号楼

本发明涉及测序文库构建中5’和3’接头连接副产物的去除方法。
具体而言，本发明提供一种切割RNA‑DNA：cDNA杂交双链体的方法，所述方法包括混合Cas酶、sgRNA和所述RNA‑DNA：cDNA杂交双链体的步骤；其中，该杂交双链体中的DNA部分包含该Cas酶识别的前间区序列邻近基序(PAM序列)；该sgRNA能特异性结合该cDNA链的一部分；和该Cas酶能特异性识别该sgRNA，并切割所述杂交双链体；任选地，所述RNA‑DNA：cDNA杂交双链体产生于RNA测序文库的构建过程中；以及任选地，所述RNA为RNA测序文库构建过程中使用的5’接头，所述DNA为RNA测序文库构建过程中使用的3’接头。