本发明提供一种抗尿苷酸反馈抑制的氨甲酰磷酸合成酶突变体及其应用,所述突变体是在氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的氨甲酰磷酸合成酶基础上,将第1006位的赖氨酸突变为丙氨酸得到突变体K1006A,或者将第1015位天冬酰胺突变为苯丙氨酸得到突变体N1015F。
本发明的突变酶N1015F与K1006A较野生型Ec‑CarAB分别表现出解除抑制剂UMP的反馈抑制以及催化活性的提高。
N1015F初始酶活较WT无变化,随着抑制剂UMP浓度的提高,其活性不变。
K1006A其初始酶活较野生型提高了12%,随着UMP浓度的提高,其酶活逐步降低,并在20mM UMP浓度下达到饱和,相对酶活仍能够维持在65%以上。
李志敏 沈苏
华东理工大学
200237 上海市徐汇区梅陇路130号
本发明提供一种抗尿苷酸反馈抑制的氨甲酰磷酸合成酶突变体及其应用,所述突变体是在氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的氨甲酰磷酸合成酶基础上,将第1006位的赖氨酸突变为丙氨酸得到突变体K1006A,或者将第1015位天冬酰胺突变为苯丙氨酸得到突变体N1015F。
本发明的突变酶N1015F与K1006A较野生型Ec‑CarAB分别表现出解除抑制剂UMP的反馈抑制以及催化活性的提高。
N1015F初始酶活较WT无变化,随着抑制剂UMP浓度的提高,其活性不变。
K1006A其初始酶活较野生型提高了12%,随着UMP浓度的提高,其酶活逐步降低,并在20mM UMP浓度下达到饱和,相对酶活仍能够维持在65%以上。