本发明提供一种同时进行HBV DNA定量、基因分型及RT区突变检测方法,其中采用了引物为F:5’ GCCTCAGTCCGTTTCTC 3’,R:5’ AAAGGGACTCAAGATGTTGT 3’,以及体系A和体系B的探针,引入探针熔解曲线法结合COLD‑PCR,用于HBV RT区179~191、193~208已知及未知的突变DNA的定量检测(该RT区的准种差异最具显著性)。
本方法不需要添加昂贵的设备,仅通过反应体系的优化和后期熔解曲线分析,就可实现对低比例突变株的灵敏检测,特别适合在普通的临床基因扩增实验室推广开展。
欧启水 刘灿 陈添彬 商红艳 曾勇彬
福建医科大学附属第一医院
350005 福建省福州市台江区茶中路20号
本发明提供一种同时进行HBV DNA定量、基因分型及RT区突变检测方法,其中采用了引物为F:5’ GCCTCAGTCCGTTTCTC 3’,R:5’ AAAGGGACTCAAGATGTTGT 3’,以及体系A和体系B的探针,引入探针熔解曲线法结合COLD‑PCR,用于HBV RT区179~191、193~208已知及未知的突变DNA的定量检测(该RT区的准种差异最具显著性)。
本方法不需要添加昂贵的设备,仅通过反应体系的优化和后期熔解曲线分析,就可实现对低比例突变株的灵敏检测,特别适合在普通的临床基因扩增实验室推广开展。