本发明公开了一种西瓜倍性检测方法。
步骤包括：原生质体制备、总DNA提取、定量PCR法检测DNA浓度。
以不同倍性西瓜叶片为材料分离原生质体，提取等量原生质体中的总DNA，根据西瓜5S rDNA序列设计定量PCR特异引物，以不同浓度DNA绘制Ct值与DNA浓度的标准曲线，根据不同倍性西瓜DNA溶液测得Ct值换算其浓度并计算其倍性。
本发明对样品要求较低，除营养物质较多的果实、种子之外的其他植物组织均可进行原生质体分离；对仪器设备要求较低，价格低廉的荧光定量PCR仪可满足需求，无需购置价格相对昂贵的流式细胞仪；准确性与流式细胞法相近，检测精度高于气孔保卫细胞叶绿体计数法，操作流程较染色体计数法更容易实现；为西瓜倍性检测提供了新的途径。

张娜 黄兴 曾红霞 汤谧 任俭 孙玉宏 李其友 陈伟 熊建顺 毕秋荣

武汉市农业科学院

430345 湖北省武汉市黄陂区武湖生态农业园农科院北部园区

本发明公开了一种西瓜倍性检测方法。
步骤包括：原生质体制备、总DNA提取、定量PCR法检测DNA浓度。
以不同倍性西瓜叶片为材料分离原生质体，提取等量原生质体中的总DNA，根据西瓜5S rDNA序列设计定量PCR特异引物，以不同浓度DNA绘制Ct值与DNA浓度的标准曲线，根据不同倍性西瓜DNA溶液测得Ct值换算其浓度并计算其倍性。
本发明对样品要求较低，除营养物质较多的果实、种子之外的其他植物组织均可进行原生质体分离；对仪器设备要求较低，价格低廉的荧光定量PCR仪可满足需求，无需购置价格相对昂贵的流式细胞仪；准确性与流式细胞法相近，检测精度高于气孔保卫细胞叶绿体计数法，操作流程较染色体计数法更容易实现；为西瓜倍性检测提供了新的途径。