本发明公开了一种基于少量细胞全基因组染色质高分辨率构象技术eHi‑C 2.0.本发明提供了一种细胞eHi‑C 2.0测序文库的制备方法为:裂解细胞得到染色质,再酶切所述染色质;将所述酶切后DNA依次经标记物标记和钝端连接,得到环化产物;向所述环化产物中引入内参环状共沉淀DNA分子;再用限制性外切酶酶切,再进行超声打断,再用免疫磁珠从打断产物中抓取带有所述标记物的DNA片段;用所述带有所述标记物的DNA片段制备eHi‑C 2.0测序文库。
本发明能对数量低至0.1million细胞的进行全基因组染色质构象技术eHi‑C建库测序。
张玉波 孔思远 黄其通 李琳 黄雷 白立景 彭艳玲
中国农业科学院农业基因组研究所
广东省深圳市大鹏新区鹏飞路7号中国农业科学院深圳农业基因组研究所
本发明公开了一种基于少量细胞全基因组染色质高分辨率构象技术eHi‑C 2.0.本发明提供了一种细胞eHi‑C 2.0测序文库的制备方法为:裂解细胞得到染色质,再酶切所述染色质;将所述酶切后DNA依次经标记物标记和钝端连接,得到环化产物;向所述环化产物中引入内参环状共沉淀DNA分子;再用限制性外切酶酶切,再进行超声打断,再用免疫磁珠从打断产物中抓取带有所述标记物的DNA片段;用所述带有所述标记物的DNA片段制备eHi‑C 2.0测序文库。
本发明能对数量低至0.1million细胞的进行全基因组染色质构象技术eHi‑C建库测序。