利用离心种植构建组织工程膀胱的方法
摘要文本
本发明提供了一种利用离心种植构建组织工程膀胱的方法。该方法包括:利用离心种植设备制备膀胱脱细胞基质‑种子细胞悬浮液结构;将膀胱脱细胞基质‑种子细胞悬浮液结构放置于离心机中,离心机按照指定转速离心运转指定时间;将离心后的膀胱脱细胞基质放置于培养皿中,利用培养好的膀胱脱细胞基质构建组织工程膀胱。本发明构建了一套离心种植设备,并探寻了较为适宜的离心机转速和离心种植时间。相比于常用的静态种植,以及压力灌注种植、旋转瓶种植等动态种植方式,离心种植所需的细胞量较少,且离心力可以使种子细胞均匀分布于支架内壁,使种植细胞进入到膀胱脱细胞基质的内部,形成三维立体种植,使制备的组织工程膀胱更为贴合实际膀胱组织。
申请人信息
- 申请人:中国人民解放军总医院
- 申请人地址:100853 北京市海淀区复兴路28号
- 发明人: 中国人民解放军总医院
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 利用离心种植构建组织工程膀胱的方法 |
| 专利类型 | 发明授权 |
| 申请号 | CN201810545649.X |
| 申请日 | 2018年5月25日 |
| 公告号 | CN108379661B |
| 公开日 | 2024年1月23日 |
| IPC主分类号 | A61L27/36 |
| 权利人 | 中国人民解放军总医院 |
| 发明人 | 符伟军 |
| 地址 | 北京市海淀区复兴路28号 |
专利主权项内容
1.一种利用离心种植构建组织工程膀胱的方法,其特征在于,包括:利用离心种植设备制备膀胱脱细胞基质-种子细胞悬浮液结构;将膀胱脱细胞基质-种子细胞悬浮液结构放置于离心机中,离心机按照指定转速离心运转指定时间;将离心后的膀胱脱细胞基质放置于培养皿中,利用培养好的膀胱脱细胞基质构建组织工程膀胱;利用离心种植设备制备膀胱脱细胞基质-种子细胞悬浮液结构之前还包括:选取离心种植设备,该离心种植设备包括:预先制备的种子细胞悬液;制备的膀胱脱细胞基质;3-0慕丝线3根;离心机一台;10cm的培养皿;利用离心种植设备制备膀胱脱细胞基质-种子细胞悬浮液结构,包括:利用2根3-0慕丝线将膀胱脱细胞基质两侧的输尿管断端结扎,用注射器将1×10的种子细胞悬液2mL通过膀胱下端的流出道注射到膀胱脱细胞基质中,用1根3-0慕丝线将膀胱脱细胞基质的流出道结扎,得到制备的膀胱脱细胞基质-种子细胞悬浮液结构;6将膀胱脱细胞基质-种子细胞悬浮液结构放置于离心机中,离心机按照指定转速离心运转指定时间,包括:将膀胱脱细胞基质-种子细胞悬浮液结构放置于容积为20mL的离心管中,再将离心管放置于离心机中,配平后,离心机按照转速2400rpm/min离心运转8min,用剪刀将膀胱脱细胞基质两侧的输尿管的结扎线和膀胱脱细胞基质的流出道的结扎线剪断,将膀胱脱细胞基质中的悬浮有种子细胞的培养液丢弃;将离心后的膀胱脱细胞基质放置于培养皿中,利用培养好的膀胱脱细胞基质构建组织工程膀胱,包括:将离心后的膀胱脱细胞基质放置于10cm的培养皿中后,再将培养皿放置于37℃、含5%CO的孵箱中培养2h,使种植于膀胱脱细胞基质中的种子细胞黏附,然后,向培养皿中加入20mL培养基,使离心后的膀胱脱细胞基质完全浸没在培养基中,继续培养膀胱脱细胞基质设定时间后,利用培养好的膀胱脱细胞基质构建组织工程膀胱。2