用汉逊酵母表达系统产生HPV33 L1蛋白的方法

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更多数据： 1.一种产生HPV33 L1蛋白的方法，包括以下步骤：i) 产生表达人乳头瘤病毒33型L1(HPV33 L1)蛋白的重组汉逊酵母细胞；ii) 在适于所述HPV33 L1蛋白表达的条件下培养所述重组汉逊酵母细胞；和iii) 从培养物中回收并纯化所述HPV33 L1蛋白；其中步骤i)包含以下步骤：a)通过将包含编码HPV33 L1蛋白的核苷酸序列的外源多核苷酸插入序列示于SEQ IDNO : 9 的载体来构建表达构建体；b)用步骤a)中获得的表达构建体转化汉逊酵母细胞；和c)先后用Zeocin抗性筛选和G418抗性筛选对步骤b)中获得的汉逊酵母细胞进行筛选，获得含有拷贝数大于60的所述外源多核苷酸的重组汉逊酵母细胞；其中步骤b)中的所述汉逊酵母细胞是ATCC26012汉逊酵母细胞，其中Zeocin的浓度是0.5mg/ml，G418的浓度是16mg/ml；其中步骤iii)中首先用层析介质POROS XS 进行初步纯化，随后利用层析介质Macro-Prep 陶瓷羟基磷灰石进一步纯化，其中所述编码HPV33 L1蛋白的核苷酸序列示于SEQ ID NO : 2。