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具有免疫抑制作用禽白血病病毒衣壳蛋白真核表达载体的构建方法及应用
摘要文本
具有免疫抑制作用禽白血病病毒衣壳蛋白真核表达载体的构建方法及应用,涉及病毒编码蛋白表达及功能研究生物技术领域。本发明以pGEX‑6p‑1‑p27/BL21质粒作为模板,采用特异性引物进行PCR扩增,回收PCR片段后与pcDNA3.1载体链接,得到阳性的重组质粒,即具有抑制细胞对LPS和Poly(I : C)刺激免疫反应功能的真核表达载体。本发明构建方法简单、合理,真核表达载体转染细胞表达后,可应用于抑制LPS或Poly(I : C)刺激细胞免疫反应中,为抗禽白血病免疫抑制药物的研究与开发提供靶点。
申请人信息
- 申请人:扬州大学
- 申请人地址:225009 江苏省扬州市大学南路88号
- 发明人: 扬州大学
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 具有免疫抑制作用禽白血病病毒衣壳蛋白真核表达载体的构建方法及应用 |
| 专利类型 | 发明授权 |
| 申请号 | CN201710763557.4 |
| 申请日 | 2017年8月30日 |
| 公告号 | CN107365787B |
| 公开日 | 2024年2月6日 |
| IPC主分类号 | C12N15/66 |
| 权利人 | 扬州大学 |
| 发明人 | 钱琨; 孙舒; 秦爱建; 程晓薇; 孔正茹; 顾晨曦; 武宗仪 |
| 地址 | 江苏省扬州市大学南路88号 |
专利主权项内容
1. 具有抑制细胞对 LPS 和 Poly(I : C)刺激免疫反应功能的禽白血病病毒衣壳蛋白真核表达载 体的构建方法,其特征在于:以 pGEX-6p-1-p27/BL21 质粒作为模板,所述质粒公布于专利申请号201310046928.9,利用以下特异性引物 进行 PCR 扩增: F:gcggatccat gccatccgag tcctttgtt ; R:gcctcgagct tatcgtcgtc atccttgtaa tcggccgcgg ctatgccttg ;回收双酶切 PCR 片段后与 pcDNA3.1 载体链接,得到具有抑制细胞对 LPS 和 Poly(I : C)刺激免 疫反应功能的真核表达载体;所述 PCR 条件为:95℃预变性 5min,然后 94℃ 1min,52℃ 30 s,72℃1min,35 个循环, 72℃、7min,4℃保持。 关注微信公众号马克数据网