一种中药制剂清降片的鉴别方法

专利主权项内容

1.一种中药制剂清降片的鉴别方法，其中所述的中药制剂配方由中药材蚕砂41.68g、大黄41.68g、青黛20.84g、玄参41.68g、皂角子41.68g、赤芍41.68g、板蓝根41.68g、麦冬41.68g、连翘41.68g、牡丹皮27.08g、地黄41.68g、甘草13.76g、白茅根41.68g、金银花41.68g、薄荷脑0.104g、川贝母5.20g组成，按上述中药制剂配方共制成1000片或2000片，其特征在于，该方法包括下列步骤：(1)清降片中所含靛蓝、靛玉红用薄层色谱法鉴别：a.对照品溶液的制备：取靛蓝对照品、靛玉红对照品，加三氯甲烷制成每1ml含靛蓝1.0mg和靛玉红0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液；b.供试品溶液的制备：取清降片2.5g，研细，加30-60℃的石油醚50ml，超声处理45分钟，滤过，弃去滤液，药渣挥去溶剂，加三氯甲烷50ml，超声处理45分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；c.薄层色谱法试验：吸取上述对照品溶液5μl，供试品溶液2-5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；所述甲苯-三氯甲烷-丙酮的配比为5∶4∶1；(2)清降片中所含连翘苷用薄层色谱法鉴别：a.对照品溶液的制备：取连翘苷对照品，加甲醇制成每1ml含连翘苷1.0mg的溶液，作为对照品溶液；b.供试品溶液的制备：取清降片2.5g，研细，加30-60℃的石油醚50ml，超声处理45分钟，滤过，弃去滤液，药渣挥去溶剂，加三氯甲烷50ml，超声处理45分钟，滤过，弃去滤液，药渣挥去溶剂，加甲醇45ml，超声处理45分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，离心，取上清液，通过D101型大孔吸附树脂柱，先后分别用30％乙醇和70％乙醇各60ml洗脱，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；所述D101型大孔吸附树脂柱柱内径为1.5cm，柱高为16cm；c.薄层色谱法试验：吸取上述对照品溶液5μl，供试品溶液5-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-无水甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；所述三氯甲烷-甲醇-无水甲酸的配比为17∶2∶1.5；(3)清降片中所含芍药苷用薄层色谱法鉴别：a.对照品溶液的制备：取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含芍药苷1.0mg的溶液，作为对照品溶液；b.供试品溶液的制备：取清降片2.5g，研细，加30-60℃石油醚50ml，超声处理45分钟，滤过，弃去滤液，药渣挥干溶剂，加三氯甲烷50ml，超声处理45分钟，滤过，弃去滤液，药渣挥干溶剂，加甲醇40ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，加在聚酰胺柱上，用水60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；所述聚酰胺柱粒度规格为80-100目，填料量为3g，内径为1.5cm，用水50ml预洗；c.薄层色谱法试验：吸取上述对照品溶液5μl，供试品溶液5-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；所述三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸的配比为40∶5∶10∶0.2；(4)清降片中所含甘草对照药材用薄层色谱法鉴别：a.对照药材溶液的制备：取甘草对照药材1g，加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，用水饱和正丁醇振摇提取3次，每次10ml，合并正丁醇提取液，用水洗涤2次，每次10ml，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为对照药材溶液；b.供试品溶液的制备：取清降片2.5g，研细，加30-60℃石油醚50ml，超声处理45分钟，滤过，弃去滤液，药渣挥干溶剂，加三氯甲烷50ml，超声处理45分钟，滤过，弃去滤液，药渣挥干溶剂，加甲醇40ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，加在聚酰胺柱上，先用水60ml洗脱，弃去洗脱液，再用乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；所述聚酰胺柱粒度规格为80-100目，填料量为3g，内径为1.5cm，用水50ml预洗；c.薄层色谱法试验：吸取上述对照品溶液2μl，供试品溶液5-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点；所述三氯甲烷-甲醇-水的配比为40∶10∶1；(5)清降片中药材大黄所含大黄素和大黄酚的总量用高效液相色谱法测定：a.色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-0.1％磷酸水溶液为流动相，两者配比为85：15，检测波长为254nm，理论板数按大黄素峰计算应不低于6000；b.对照品溶液的制备：取大黄素对照品、大黄酚对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含大黄素15μg，大黄酚30μg的混合溶液，作为对照品溶液；c.供试品溶液的制备：取清降片2.5g，除去包衣，研细，精密称定，取0.40g，精密称定置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置烧瓶中，减压回收溶剂至干，将盐酸22ml加水使成100ml的盐酸溶液，残渣加盐酸溶液10ml，超声处理2分钟，再加三氯甲烷10ml，加热回流1小时，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷振摇提取3次，每次10ml，合并三氯甲烷液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；d.高效液相色谱法测定：分别精密吸取对照品溶液5μl及供试品溶液10μI，注入高效液相色谱仪，测定；清降片含大黄按大黄素和大黄酚的总量计，应不得少于0.72mg/g。