一种HPV16/18病毒基因在宫颈脱落细胞中DNA和mRNA的POCT检测方法
摘要文本
本发明涉及基因检测的领域，公开了一种HPV16/18病毒基因在宫颈脱落细胞中DNA和mRNA的POCT检测方法，包括样本采集与处理、冻干反应体系、基于POCT检测平台的DNA和mRNA检测及数据分析；本发明靶向HPV16/18的E6/E7基因设计特异性引物，基于实时荧光定量PCR(qPCR)和定量逆转录PCR(RT‑qPCR)技术方法，采用预冻干反应试剂，通过简单样本处理在POCT检测仪器上对宫颈脱落细胞样品中HPV16/18E6/E7基因的DNA和mRNA同时进行检测，qPCR和RT‑qPCR两个反应计算所得的两个CT值的差值可评估待检样本中HPV16/18的E6/E7基因mRNA的转录水平，进而提示宫颈癌发生相关的HPV16/18的E6/E7基因是否整合进入人基因组中，为临床患者的HPV感染和宫颈癌筛查提供更加快速、便捷和准确的判断依据。
申请人信息
- 申请人:海宁奥羚医学检验实验室有限公司
- 申请人地址:314499 浙江省嘉兴市海宁市海洲街道长丰路446号银河科技大厦20602室(自主申报)
- 发明人: 海宁奥羚医学检验实验室有限公司
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种HPV16/18病毒基因在宫颈脱落细胞中DNA和mRNA的POCT检测方法 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311815820.1 |
| 申请日 | 2023/12/27 |
| 公告号 | CN117757991A |
| 公开日 | 2024/3/26 |
| IPC主分类号 | C12Q1/70 |
| 权利人 | 海宁奥羚医学检验实验室有限公司 |
| 发明人 | 郭强; 毋晓宁; 肖小龙; 须周恒; 许德德 |
| 地址 | 浙江省嘉兴市海宁市海洲街道长丰路446号银河科技大厦20602室(自主申报) |
专利主权项内容
1.一种HPV16/18病毒基因在宫颈脱落细胞中DNA和mRNA的POCT检测方法，用于提示宫颈癌发生相关的HPV16/18基因人体基因组整合，包括样本采集与处理、冻干反应体系、基于POCT检测平台的DNA和mRNA检测及数据分析；将宫颈刷采集的宫颈脱落细胞样本与A管中样本处理液混合处理；所述反应体系包括：将处理后的样本分别与B1管中的冻干粉和B2管中的冻干粉溶解混匀，获得反应液管B1和B2；将溶液试剂B1和溶液试剂B2分别转移至POCT仪器适配的反应管内，通过POCT仪器分别进行qPCR和RT-qPCR扩增反应；扩增反应完毕后，POCT仪器分析扩增曲线并得出两个反应的CT值，CT1和CT2，两者相减获得ΔCT值；通过将ΔCT值与临床样本检测结果分析所得截断值N进行比对，可评估待检样本中HPV16/18的E6/E7基因mRNA的转录水平，进而提示宫颈癌发生相关的HPV16/18的E6/E7基因是否整合进入人基因组。