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一种多杀性巴氏杆菌外膜囊泡的制备方法及其应用
摘要文本
本发明公开一种多杀性巴氏杆菌外膜囊泡的制备方法及其应用，包括下述步骤：将多杀性巴氏杆菌划线接种于马丁肉汤固体培养基平板上进行培养；取预培养菌液的上清液，离心，过滤，将滤液收集到超滤器中浓缩，浓缩液超速离心，弃上清液，沉淀用PBS缓冲液重悬，于‑80℃条件下冻存；先制备氨基修饰的介孔二氧化硅纳米粒使其带正电；将二氧化硅分散液与石斛多糖在室温下剧烈搅拌后，离心处理水洗，即得介孔二氧化硅载石斛多糖；用微型挤出机对介孔二氧化硅载石斛多糖和外膜囊泡行挤压，然后灭菌，得到多杀性巴氏杆菌外膜囊泡。本发明制得的外膜囊泡包裹介孔二氧化硅载石斛多糖可以产生强大而持久的抗菌免疫力。
申请人信息
- 申请人:浙江省农业科学院
- 申请人地址:310009 浙江省杭州市上城区笕桥街道德胜中路298号
- 发明人: 浙江省农业科学院
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种多杀性巴氏杆菌外膜囊泡的制备方法及其应用 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311412769.X |
| 申请日 | 2023/10/29 |
| 公告号 | CN117462664A |
| 公开日 | 2024/1/30 |
| IPC主分类号 | A61K39/02 |
| 权利人 | 浙江省农业科学院 |
| 发明人 | 黄叶娥; 孙嘉迎; 崔雪梅; 刘燕; 鲍国连; 季权安; 胡子喆 |
| 地址 | 浙江省杭州市上城区德胜中路298号省农科院食品所(新区5号楼503) |
专利主权项内容
1.一种多杀性巴氏杆菌外膜囊泡的制备方法，其特征在于包括下述步骤：(1)外膜囊泡的制备将多杀性巴氏杆菌划线接种于马丁肉汤固体培养基平板上进行培养，然后挑取单菌落接种于马丁肉汤培养基中进行培养，扩大培养后得预培养菌液；取预培养菌液的上清液，超速离心，过滤，将滤液收集到超滤器中浓缩，浓缩液超速离心，弃上清液，沉淀用PBS缓冲液重悬，于-80℃条件下冻存；(2)介孔二氧化硅载石斛多糖纳米颗粒的合成将介孔二氧化硅分散于甲苯中，超声中加入APTES反应，离心收集沉淀，沉淀用乙醇和ddHO分别洗涤数次后，分散于ddHO中，得到氨基修饰的介孔二氧化硅纳米粒使其带正电；将二氧化硅分散液与石斛多糖在室温下剧烈搅拌后，离心处理，水洗两次，即得介孔二氧化硅载石斛多糖；22(3)外膜囊泡包裹介孔二氧化硅载石斛多糖的合成：用装有0.2μm聚碳酸酯薄膜过滤膜的微型挤出机对介孔二氧化硅载石斛多糖和外膜囊泡挤压数次进行结合，得到多杀性巴氏杆菌外膜囊泡DP-MSN-OMV。