可实现支链氨基酸联产的基因工程菌株的构建及其应用
摘要文本
本发明涉及可实现支链氨基酸联产的基因工程菌株的构建及其应用，可实现发酵法联合生产支链氨基酸(BCAA)如缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸。采用基因工程的方法获得基因工程菌株，所述基因工程菌株是通过在可生产异亮氨酸和/或缬氨酸的大肠杆菌宿主细胞中引入亮氨酸的合成途径，通过表达解除L‑亮氨酸反馈抑制的异丙基苹果酸合成酶编码基因leuAm、异丙基苹果酸脱氢酶编码基因leuB、异丙基苹果酸脱水酶编码基因leuCD、芳香氨基酸转氨酶基因tyrB和亮氨酸外排蛋白基因leuE。最终实现两种或三种支链氨基酸的联产，而且联产工艺在总体葡萄糖的利用率上至少有30％以上的提高。本发明所述的基因工程菌株发酵周期短、产量高、转化率高，具有较高的生产应用价值。
申请人信息
- 申请人:元素驱动(杭州)生物科技有限公司
- 申请人地址:310012 浙江省杭州市西湖区三墩镇西园七路1号绿方科创303室
- 发明人: 元素驱动(杭州)生物科技有限公司
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 可实现支链氨基酸联产的基因工程菌株的构建及其应用 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202310501403.3 |
| 申请日 | 2023/4/28 |
| 公告号 | CN117757705A |
| 公开日 | 2024/3/26 |
| IPC主分类号 | C12N1/21 |
| 权利人 | 元素驱动(杭州)生物科技有限公司 |
| 发明人 | 张科春; 黄浩; 倪梦寒; 王靖宇; 孙村民; 朱湘成 |
| 地址 | 浙江省杭州市西湖区三墩镇西园七路1号绿方科创303室 |
专利主权项内容
1.一种可实现支链氨基酸联产的基因工程菌株，所述菌株表达：1)至少一个编码多肽的DNA分子，该多肽催化α-异丙基苹果酸合成；2)至少一个编码多肽的DNA分子，该多肽催化α-异丙基苹果酸异构反应β-异丙基苹果酸；3)至少一个编码多肽的DNA分子，该多肽催化β-异丙基苹果酸脱氢生成α-酮异己酸；4)至少一个编码多肽的DNA分子，该多肽催化芳香氨基酸转氨至α-酮异己酸生成亮氨酸；以及：5)至少一个编码多肽的DNA分子，该多肽催化从苏氨酸生成丁酮酸，优选地为实质上解除了L-异亮氨酸抑制的苏氨酸脱氨酶的基因，进一步优选地，所述实质上解除了L-异亮氨酸的抑制的苏氨酸脱氨酶的基因为解除型ilvA基因和/或6)至少一个编码多肽的DNA分子，该DNA分子为乙酰乳酸合成酶/乙酰羟基丁酸合成酶的基因，优选地上述基因为实质上解除了L-异亮氨酸和/或缬氨酸抑制的乙酰乳酸合成酶/乙酰羟基丁酸合成酶基因，进一步优选地，所述实质上解除了L-异亮氨酸和/或L-缬氨酸的抑制的乙酰乳酸合成酶/乙酰羟基丁酸合成酶的基因为解除型ilvIH基因、解除型ilvBN基因、解除型ilvGM基因、解除型alsS基因中的一种或多种；所述DNA分子至少一个的表达被增强。 （macrodatas.cn）