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一种高质高量云南松枝条总DNA提取方法
摘要文本
本发明属于分子生物学实验领域，尤其是一种高质高量云南松枝条总DNA提取方法，针对现有的DNA严重降解且杂质含量高会致使有效分子数据量捕获效率降低，严重影响科研结论的完整性和正确性的问题，现提出如下方案，其包括以下步骤：步骤一、树枝条硅胶干燥：野外采集带有芽的枝条，弃芽后剪段装入盛有硅胶的密封袋中，带回实验室室温干燥；步骤二、液氮研磨：用锋利剪刀将枝条剪碎，本发明能充分裂解释放枝条中DNA，可有效地去除多糖、酚类及松脂等杂质，使所提DNA高质高量，在DNA凝胶成像时主带明显，胶孔中无杂质沉积，超微量分光光度计检测DNA浓度和纯度高，DNA能成功进行后续的PCR扩增等分子实验。
申请人信息
- 申请人:中国林业科学研究院高原林业研究所
- 申请人地址:650000 云南省昆明市盘龙区白龙寺
- 发明人: 中国林业科学研究院高原林业研究所
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种高质高量云南松枝条总DNA提取方法 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202410022612.4 |
| 申请日 | 2024/1/8 |
| 公告号 | CN117821446A |
| 公开日 | 2024/4/5 |
| IPC主分类号 | C12N15/10 |
| 权利人 | 中国林业科学研究院高原林业研究所 |
| 发明人 | 缪迎春; 崔凯; 李仲牧 |
| 地址 | 云南省昆明市盘龙区白龙寺 |
专利主权项内容
1.一种高质高量云南松枝条总DNA提取方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、树枝条硅胶干燥：野外采集带有芽的枝条，弃芽后剪段装入盛有硅胶的密封袋中，带回实验室室温干燥；步骤二、液氮研磨：用锋利剪刀将枝条剪碎，在研钵中放入PVP和液氮将枝条研磨至粉末状；步骤三、木粉过筛：研磨好的木粉过100目筛后装入2.0mL灭菌离心管；步骤四、裂解释放DNA：加入裂解液，水浴对粉末状样品进行裂解释放DNA；步骤五、抽提DNA：利用苯酚、氯仿和异戊醇对经过裂解消化处理的样本进行DNA抽提；步骤六、挑取DNA：利用冰冻无水乙醇沉淀DNA时候，用灭菌枪头挑取絮状DNA至1.5mL灭菌离心管中；步骤七、洗涤DNA：用75％的乙醇清洗DNA；步骤八、溶解DNA：清洗干净的DNA室温风干后，加入灭菌ddH2O于4℃冰箱中溶解；步骤九、检测DNA：通过琼脂糖凝胶电泳直观检测DNA；通过超微量分光光度计检测DNA浓度和纯度。。来源：马 克 数 据 网