一种鸡原始生殖细胞体外无血清扩增培养的方法

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1.一种鸡原始生殖细胞体外无血清扩增培养的方法，其特征在于；包括以下步骤：S1、不含胎牛血清的培养基的配置培养基中不含胎牛血清，所述培养基中包括KO-DMEM、抑制剂、鸡血清、双抗、丙酮酸钠、谷氨酰胺、核苷、β-巯基乙醇、肝素钠、重组人源FGF、非必需氨基酸、B-27和人ActivinA；S2、鸡原始生殖细胞的分离与培养将种蛋进行孵化，消毒蛋壳，将种蛋打开后置于培养皿中，在体式显微镜下分离出性腺置于磷酸缓冲液中；向磷酸缓冲液中加入胰酶消化液进行消化处理，终止消化后进行离心处理，得到鸡原始生殖细胞；将所述鸡原始生殖细胞移入细胞培养板中，加入新鲜配制的培养液进行培养，隔天进行半量换液，然后进行传代培养；S3、细胞增殖计数将培养的鸡原始生殖细胞用PBS重悬，用细胞计数仪计数后计算细胞总量，并等量分为两组，每组三个重复，分别加入新鲜配制的所述不含胎牛血清的培养基，培养后分别取样计数，计算细胞浓度与增殖率。