Klrb1基因完全敲除的抗多杀性巴氏杆菌猪模型的构建方法

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本发明公开了一种Klrb1基因完全敲除的抗多杀性巴氏杆菌猪模型的构建方法，猪Klrb1基因完全敲除动物模型的打靶位点sgRNA核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明利用高效精准的CRISPR/Cas9技术，通过电转染法构建了Klrb1基因完全敲除的的成纤维细胞系。加以体细胞核移植技术和胚胎移植技术获得Klrb1基因完全敲除基因编辑猪。获得的Klrb1基因完全敲除基因编辑猪，进行多杀性巴氏杆菌的抗毒实验验证，Klrb1完全敲除猪具有较强的抗毒能力。本发明基于CRISPR/Cas9基因编辑系统首次实现对猪Klrb1基因的完全缺失，本实验操作具有操作便利、敲除效率高的优势。