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一种蛋白固定化修饰的细胞培养容器
摘要文本
上海晶诺生物科技有限公司取得“一种透气窗帘布”专利技术，本发明公开了一种蛋白定向固定化修饰的细胞培养容器。本发明首先构建了一种GMCSF与IL4的融合蛋白，以及一种内壁包被有蛋白的细胞培养容器。该细胞培养容器的制备方法为：给蛋白加上His标签；对细胞培养容器的内壁进行硅烷化处理；对细胞培养容器的内壁进行AB‑NTA孵育修饰；加入NiCl2溶液使AB‑NTA与Ni偶联；加入含有His标签的蛋白，与AB‑NTA中的镍离子进行亲和，使其固定在细胞培养容器的内壁。使用本发明的细胞培养容器培养细胞的过程中，包被的蛋白不会在更换培养液时损失掉，因此无需多次重新加入，也保证了所用蛋白质量的一致性，使得整个培养过程的不可控因素减小，保证细胞培养及分化的效果，同时，具有可逆性、多次利用的优点。
专利主权项内容
1.一种蛋白定向固定化修饰的细胞培养容器在诱导单核细胞分化为树突状前体细胞中的应用，其特征在于，所述细胞培养容器的内壁包被有蛋白，所述蛋白为蛋白GMCSF与蛋白IL4的融合蛋白，蛋白GMCSF的氨基酸序列如SEQ ID NO : 1所示，蛋白IL4的氨基酸序列如SEQ ID NO : 2所示，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO : 3或SEQ ID NO : 4所示，所述细胞容器用于诱导单核细胞分化为树突状前体细胞；当培养容器的内壁为玻璃时，所述细胞培养容器的制备方法包括如下步骤：S1.给蛋白加上His标签；S2.对细胞培养容器的内壁进行硅烷化处理；S3.对细胞培养容器的内壁进行AB-NTA孵育修饰；S4.加入NiCl2溶液使NTA与Ni偶联，完成镍离子包被；S5.加入含有His标签的蛋白，与包被的镍离子进行亲和，使其固定在细胞培养容器的内壁。 （来 自 马 克 数 据 网）
专利申请信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种蛋白固定化修饰的细胞培养容器 |
| 专利类型 | 发明授权 |
| 申请号 | CN201810186457.4 |
| 申请日 | 2018年3月7日 |
| 公告号 | CN108314740B |
| 公开日 | 2024年2月27日 |
| IPC主分类号 | C07K19/00 |
| 权利人 | 上海晶诺生物科技有限公司 |
| 发明人 | 周亚凤; 王绪德; 申兆兴; 刘雪宾 |
| 地址 | 上海市浦东新区张江高科技园区蔡伦路780号4楼A座 |