← 返回列表
一种从动物胆汁中提取鹅去氧胆酸的方法
申请人信息
- 申请人:临沂大学; 山东江正生物技术有限公司
- 申请人地址:276000 山东省临沂市兰山区工业大道北段西侧
- 发明人: 临沂大学; 山东江正生物技术有限公司
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种从动物胆汁中提取鹅去氧胆酸的方法 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311790148.5 |
| 申请日 | 2023/12/25 |
| 公告号 | CN117736253A |
| 公开日 | 2024/3/22 |
| IPC主分类号 | C07J9/00 |
| 权利人 | 临沂大学; 山东江正生物技术有限公司 |
| 发明人 | 史晓委; 鞠文广; 王兆雪; 郭天廷; 赵志龙 |
| 地址 | 山东省临沂市兰山区工业大道北段西侧; 山东省临沂市莒南县岭泉镇淮海路西段 |
摘要文本
本发明公开一种从动物胆汁中提取鹅去氧胆酸的方法，属于化学药品原料药、制剂制造技术领域。本发明筛选两株产活性胆盐水解酶的微生物菌株，两者等比例混合发酵后，快速产生高活性的胆盐水解酶，可将动物胆汁中的结合态形式胆盐高效的解离为游离态形式，更利于后续鹅去氧胆酸的分离和纯化。本发明工艺方法简单易操作，可以用作药学研究机构对其进行生物活性，以及毒理药理研究。
专利主权项内容
1.一种从动物胆汁中提取鹅去氧胆酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备微生物菌液：将两种微生物菌株活化后，分别接种到LB液体培养基中，35-37℃、180rpm-200rpm下培养10-12h，得到两种菌的种子液；(2)将两种菌的种子液按照体积比1 : 1混合后，取10mL混合菌液接种到100mL液体发酵培养基中，混合培养24-36h，培养完成将发酵液于4℃-6℃冷冻离心收集沉淀，用无菌生理盐水洗涤沉淀，再离心得到菌体沉淀，加磷酸缓冲液制成OD为1.0-1.5的菌悬液，将菌悬液在冰浴中超声破碎，得到粗酶液；600(3)胆汁预处理：取动物胆汁，按照胆汁量体积添加粗酶液5-10mL/L，混合均匀，在35-37℃下，反应3-5h，得到预处理胆汁液；(4)将预处理胆汁液中加入乙酸丁酯，混合均匀静置分层，取乙酸丁酯层，再加入碱液进行萃取，下层溶液用酸液调节pH为3-4，此时，胆酸类物质形成沉淀析出，过滤去除废水，收集固体，水洗干燥，得鹅去氧胆酸粗品；(5)纯化：将得到的鹅去氧胆酸粗品，加入二氯甲烷，二氯甲烷用量与鹅去氧胆酸粗品的固液比为(9-11)mL：1g，升温搅拌，回流反应0.5-1小时，缓慢降温至0-5℃，搅拌结晶1-2小时，过滤，得鹅去氧胆酸精品。