← 返回列表
内源性接合质粒中成瘾性毒素-抗毒素系统的敲除方法及其应用
申请人信息
- 申请人:中国科学院南海海洋研究所
- 申请人地址:511458 广东省广州市南沙区海滨路1119号
- 发明人: 中国科学院南海海洋研究所
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 内源性接合质粒中成瘾性毒素-抗毒素系统的敲除方法及其应用 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311488318.4 |
| 申请日 | 2023/11/9 |
| 公告号 | CN117511982A |
| 公开日 | 2024/2/6 |
| IPC主分类号 | C12N15/70 |
| 权利人 | 中国科学院南海海洋研究所 |
| 发明人 | 王晓雪; 林兼仲; 郭云学; 尼松伟; 李百元; 王鹏霞 |
| 地址 | 广东省广州市南沙区海滨路1119号 |
摘要文本
中国科学院南海海洋研究所取得“一种透气窗帘布”专利技术，本发明公开了内源性接合质粒中成瘾性毒素‑抗毒素系统的敲除方法及其应用。采用本发明提供的敲除方法使得内源性接合质粒中成瘾性TA系统在敲除过程中成功地避开了PSK产生的细胞毒性作用，使得内源性接合质粒中成瘾性TA系统顺利敲除。本发明对TA系统的进一步科学研究包括其功能和应用研究有着重大贡献。
专利主权项内容
1.一种内源性接合质粒中成瘾性毒素-抗毒素系统的敲除方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)使用PKD46温度敏感型质粒分别对pHNSHP45质粒的hicA, hicAB基因进行一步法敲除，得到质粒上hicA完全敲除的菌株BW25113/pHNSHP45ΔhicA和hicAB不完全敲除的菌株BW25113/pHNSHP45ΔhicAB-m；(2)将pUC19-hicB质粒通过化学转化转进未完全敲除hicAB的菌株BW25113/pHNSHP45ΔhicAB-m感受态细胞中，筛选得到携带有pUC19-hicB质粒的完全敲除hicAB的菌株BW25113/pHSNHP45ΔhicAB/pUC19-hicB；(3)将BW25113/pHSNHP45ΔhicAB/pUC19-hicB接合转移到带有卡那霉素抗性基因的BW25113菌株中，得到完全敲除hicAB的菌株BW25113/pHSNHP45ΔhicAB。