一种角膜脱细胞的方法
申请人信息
- 申请人:广东康盾高新技术产业集团股份公司; 广东智康智能生物科技有限公司
- 申请人地址:518000 广东省广州市增城区新塘镇牛仔城横路4号
- 发明人: 广东康盾高新技术产业集团股份公司; 广东智康智能生物科技有限公司
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种角膜脱细胞的方法 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311612531.1 |
| 申请日 | 2023/11/29 |
| 公告号 | CN117653789A |
| 公开日 | 2024/3/8 |
| IPC主分类号 | A61L27/36 |
| 权利人 | 广东康盾高新技术产业集团股份公司; 广东智康智能生物科技有限公司 |
| 发明人 | 齐国光; 湛振键; 郑世鑫; 李俊; 董文娟; 李妖娆; 苏云飞; 刘世豪; 蔡秋雨; 李旭白 |
| 地址 | 广东省广州市增城区新塘镇牛仔城横路4号; |
摘要文本
广东康盾高新技术产业集团股份公司; 广东智康智能生物科技有限公司取得“一种透气窗帘布”专利技术，本发明提供一种角膜脱细胞的方法，包括以下步骤：S1浸泡处理、S2预脱、S3激光脱层、S4气磁交联、S5梯度脱水及S6辐照灭菌等步骤，利用保护液对角膜进行浸泡，通过原料选择对角膜后弹力层细胞保护，调整渗透压使角膜上皮层细胞溶胀有利于脱细胞液对其脱除，使前弹力层暴露，通过激光对其切割对前弹力层和基质层分离，再通过气磁交联能对角膜基质胶原无损伤脱除，本发明步骤协同发挥作用，脱细胞角膜高，胶原纤维排列整齐，未见细胞附着，未见染色细胞及胶原断裂现象，最大程度保护角膜基质的生物学特性并有效地去除基质细胞，保留天然角膜结构特征和功能以用于组织工程人工角膜构建，是一种较为理想的组织工程角膜的支架材料。
专利主权项内容
1.一种角膜脱细胞的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤S1、浸泡处理：将摘取的完整的动物源性角膜置于保护液中，保护液是角膜重量的3-5倍，调整保护液pH为7-9，在温度30-50℃下浸泡3-8h；步骤S2、预脱：将浸泡后角膜取出，置于脱细胞液中，角膜和脱细胞液的质量体积比为1.2g : 3-5mL，在温度-5～-2℃下使用超声振荡处理25-35min，使上皮层脱落，使角膜前弹力层暴露；步骤S3、激光脱层：将S2预脱后的角膜放入激光发生器中进行激光爆破、气化切割，去除角膜前弹力层；步骤S4、气磁交联：将S3脱去前弹力层的角膜与电磁液混合，放入离心管中，角膜与电磁液占离心管体积的1/5-1/4，往离心管内充满氮气，并用封管膜封管，在转速为4000-6000rpm下恒温振荡处理12-24h，并施加脉冲磁场，即得到脱基质细胞的角膜基质；步骤S5、梯度脱水：将步骤S4得到的角膜基质用浓度为0.01-0.3mol/L的NaCl溶液洗涤3-5次/30min，再用质量百分比为40％、60％、80％、90％、95％和100％的乙醇溶液分别依次梯度脱水，最后用体积比为5-10 : 1的甘油和水洗5-10min，得到脱细胞角膜；步骤S6、辐照灭菌：将脱细胞角膜用钴-60辐照灭菌，辐照剂量为5-10kGy。。更多数据：搜索马克数据网来源：