一种浆果果实基因组DNA高质量提取方法
申请人信息
- 申请人:南京派森诺基因科技有限公司
- 申请人地址:210000 江苏省南京市江北新区星晖路71号加速器六期3栋5层
- 发明人: 南京派森诺基因科技有限公司
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种浆果果实基因组DNA高质量提取方法 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311700609.5 |
| 申请日 | 2023/12/11 |
| 公告号 | CN117660443A |
| 公开日 | 2024/3/8 |
| IPC主分类号 | C12N15/10 |
| 权利人 | 南京派森诺基因科技有限公司 |
| 发明人 | 张晴晴; 刘浩; 孙子奎 |
| 地址 | 江苏省南京市江北新区星晖路71号加速器六期3栋5层 |
摘要文本
详见官网： 本发明公开了一种浆果果实基因组DNA高质量提取方法，涉及分子生物学技术领域，所述浆果果实基因组DNA高质量提取方法包括以下步骤：将新鲜或冷冻浆果果实样品置于研钵内，加入提前准备的PVP10并进行研磨，研磨结束后收集至离心管中备用；向离心管中加入分离液，先震荡混匀1mi n，再冰上放置10mi n，最后放入4℃冷冻离心机中，8000rpm离心5mi n；吸去离心管中的上清液体，并向底部沉淀中加入56℃预热的裂解液16m l，再振荡混匀1mi n，56℃水浴锅孵育30mi n；利用分离液有效去除浆果中多糖、多酚等杂质对于基因组DNA干扰，提高DNA的纯度，改良版的裂解液能够充分裂解浆果植物细胞，用氯仿、无水乙醇和醋酸钾过滤掉多余蛋白成分，得到的基因组DNA纯度高，DNA完整性更好。
专利主权项内容
1.一种浆果果实基因组DNA高质量提取方法，其特征在于，所述浆果果实基因组DNA高质量提取方法包括以下步骤：S1：将15g新鲜或冷冻浆果果实样品置于研钵内，加入提前准备的20mg PVP10并进行研磨，研磨时间2—3min，研磨结束后收集至50ml离心管中备用；S2：向离心管中加入20ml分离液，先震荡混匀1min，再冰上放置10min，最后放入4℃冷冻离心机中，8000rpm离心5min；S3：吸去离心管中的上清液体，并向底部沉淀中加入56℃预热的裂解液16ml，再振荡混匀1min，56℃水浴锅孵育30min，孵育期间手摇震荡几次；S4：向离心管加入除杂液A，并置于多管涡旋混匀仪震荡15min，再1200rpm离心10min；S5：转移上清液到新的50ml离心管中，向上清液中加入5ul Rnase酶震荡混匀，静置5min，加入等体积的除杂液B抽提，震荡混匀后，1200rpm离心10min，抽提后的上清液转入新的50ml离心管中，重复此步骤一次；S6：向转入新50ml离心管中的上清液内加入0.8倍体积提前预冷的异丙醇，放置于-20℃15min，让DNA沉淀析出；S7：移去上清液，用漂洗液漂洗两次，离心后干燥5min；S8：加入60ul洗脱液溶解，56℃水浴10min；S9：溶解的DNA-20℃保存。 更多数据：