一种外泌体的流式检测方法及其应用
申请人信息
- 申请人:南京联笃生物科技有限公司
- 申请人地址:211500 江苏省南京市江北新区星火路10号鼎业百泰生物大楼A座9层
- 发明人: 南京联笃生物科技有限公司
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种外泌体的流式检测方法及其应用 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311596892.1 |
| 申请日 | 2023/11/27 |
| 公告号 | CN117330481A |
| 公开日 | 2024/1/2 |
| IPC主分类号 | G01N15/14 |
| 权利人 | 南京联笃生物科技有限公司 |
| 发明人 | 张硕; 金芳芳; 徐蕊; 王霄霄 |
| 地址 | 江苏省南京市江北新区星火路10号鼎业百泰生物大楼A座9层 |
摘要文本
本发明涉及一种外泌体的流式检测方法及其应用，属于分子生物学技术领域。本发明提供了一种外泌体的流式检测方法，所述流式检测方法的纯化步骤包括：将待测样本先于300~3000 g离心10~20 min，再于8000~18000 g离心15~30 min，得到含有外泌体的经处理溶液样本。所述纯化方法利用两步不同的常规速度离心，便可使处理后的样本能够上机检测，大大减少了检测过程对价格昂贵的大型仪器(如超速离心机)和提取试剂的依赖，降低了外泌体的检测成本；并且，所述纯化方法仅需30 min的常规速度离心，便可使处理后的样本能够上机检测，大大缩短了检测时间，提高外泌体的检测效率。
专利主权项内容
1.一种外泌体的流式检测方法，其特征在于，所述流式检测方法非疾病的诊断和治疗目的，所述流式检测方法包括如下步骤：纯化步骤：将待测样本先于300~3000 g离心10~20 min，再于8000~18000 g离心15~30min，得到用于外泌体流式细胞检测的经处理溶液样本；孵育步骤：将用于外泌体流式细胞检测的经处理溶液样本与第一流式荧光抗体混合后孵育，得到孵育产物；所述第一流式荧光抗体能够与第一蛋白标记物特异性结合；所述第一蛋白标记物包括外泌体的表面蛋白；检测步骤：使用流式细胞仪对孵育产物进行流式检测，得到外泌体的流式检测结果；或者，所述流式检测方法包括如下步骤：纯化步骤：将待测样本先于300~3000 g离心10~20 min，再于8000~18000 g离心15~30min，得到用于外泌体流式细胞检测的经处理溶液样本；孵育步骤：将用于外泌体流式细胞检测的经处理溶液样本、第一流式荧光抗体和第二流式荧光抗体混合后孵育，得到孵育产物；所述第一流式荧光抗体能够与第一蛋白标记物特异性结合；所述第一蛋白标记物包括外泌体的表面蛋白；所述第二流式荧光抗体能够与第二蛋白标记物特异性结合，并且，所述第二流式荧光抗体上的荧光标记的激发光谱和发射光谱与第一流式荧光抗体上的荧光标记的激发光谱和发射光谱均不同；所述第二蛋白标记物包括外泌体的表面蛋白和/或脂质体；检测步骤：使用流式细胞仪对孵育产物进行流式检测，得到外泌体的流式检测结果。