一种双歧杆菌属快速检测及菌种同步鉴定的PCR-膜芯片法
申请人信息
- 申请人:南京市食品药品监督检验院
- 申请人地址:211100 江苏省南京市江宁区文芳路199号
- 发明人: 南京市食品药品监督检验院
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种双歧杆菌属快速检测及菌种同步鉴定的PCR-膜芯片法 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202410098084.0 |
| 申请日 | 2024/1/24 |
| 公告号 | CN117625820A |
| 公开日 | 2024/3/1 |
| IPC主分类号 | C12Q1/689 |
| 权利人 | 南京市食品药品监督检验院 |
| 发明人 | 吴海晶; 冯秋实; 刘新梅; 程逸宇; 杨军; 孙小杰; 沈威; 周海波 |
| 地址 | 江苏省南京市江宁区文芳路199号 |
摘要文本
本发明公开了一种双歧杆菌属快速检测及菌种同步鉴定的PCR‑膜芯片法，属于分子生物学分析领域。本发明筛选了不同双歧杆菌种属对应靶向基因，并对应设计了面向五种不同双歧杆菌种的特征引物和内参基因；利用尼龙膜芯片材料制备对应双歧杆菌菌种的PCR‑模芯片，并基于PCR‑模芯片开发鉴定体系。本发明的PCR‑模芯片法实现了长双歧杆菌婴儿亚种、两歧双歧杆菌、青春双歧杆菌、短双歧杆菌和动物双歧杆菌菌种的快速检测和稳定区分，检出限达到0.01 ng核酸样本，重复性和特异性强度显著，大大缩减了不同双歧杆菌菌种检出和鉴定区分的时间和步骤流程，为保健食品品质监控和掺假掺伪等提供了一种快速有效的检测新方法。
专利主权项内容
1.一种用于双歧杆菌菌种检测的成套引物和探针组合，其特征在于，所述双歧杆菌菌种包括短双歧杆菌、两歧双歧杆菌、长双歧杆菌婴儿亚种subsp. 、青春双歧杆菌和动物双歧杆菌动物亚种subsp. Animal；所述成套引物和探针组合包括如下：Bifidobacterium breveBifidobacterium bifidumBifidobacterium longuminfantisBifidobacterium adolescentisBifidobacterium animals (1)用于检测两歧双歧杆菌的引物和探针，所述引物的序列如SEQ ID NO.1和2所示，所述探针的序列如SEQ ID NO.3所示；(2)用于检测青春双岐杆菌的引物和探针，所述引物的序列如SEQ ID NO.4和5所示，所述探针的序列如SEQ ID NO.6所示；(3)用于检测短双歧杆菌的引物和探针，所述引物的序列如SEQ ID NO.7和8所示，所述探针的序列如SEQ ID NO.9所示；(4)用于检测动物双歧杆菌动物亚种的引物和探针，所述引物的序列如SEQ ID NO.10和11所示，所述探针的序列如SEQ ID NO.12所示；(5)用于检测长双歧杆菌婴儿亚种的引物和探针，所述引物的序列如SEQ ID NO.13和14所示，所述探针的序列如SEQ ID NO.15所示。