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一种酪氨酸磷酸化肽段的富集方法及其应用
申请人信息
- 申请人:嘉华药锐生物科技(昆山)有限公司
- 申请人地址:215300 江苏省苏州市昆山市花桥经济开发区金星路18号A9栋四层401
- 发明人: 嘉华药锐生物科技(昆山)有限公司
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种酪氨酸磷酸化肽段的富集方法及其应用 |
| 专利类型 | 发明授权 |
| 申请号 | CN202410044801.1 |
| 申请日 | 2024/1/12 |
| 公告号 | CN117554630B |
| 公开日 | 2024/4/2 |
| IPC主分类号 | G01N33/68 |
| 权利人 | 嘉华药锐生物科技(昆山)有限公司 |
| 发明人 | 郑乃中; 李梦林; 侯俊杰; 贾伟; 刘怡; 刘子娟 |
| 地址 | 江苏省苏州市昆山市花桥经济开发区金星路18号A9栋四层401 |
摘要文本
本发明公开了一种酪氨酸磷酸化肽段的富集方法及其应用。所述方法包括:将含酪氨酸磷酸化肽段的样品与偶联有SH2超亲体的固相在容器中混合,所述容器的底部以聚醚砜膜作为支撑筛板;清洗所述固相,从所述固相上分离所述酪氨酸磷酸化肽段。本发明设计全新的高特异性的酪氨酸磷酸化富集方法,尤其针对微量样本,采用聚醚砜膜作为筛板,能够减少非特异肽段的吸附,并能减少外源污染,有利于酪氨酸磷酸化多肽高特异性和高灵敏度的鉴定,并能进一步和特定的清洗液、洗脱液协同配合,进一步提高检测特异性和灵敏度。。
专利主权项内容
1.一种酪氨酸磷酸化肽段的富集方法,其特征在于,所述方法包括:将含酪氨酸磷酸化肽段的样品与偶联有SH2超亲体的固相在容器中混合,所述容器的底部以聚醚砜膜作为支撑筛板;清洗所述固相,从所述固相上分离所述酪氨酸磷酸化肽段;所述清洗使用的清洗液包括高盐清洗液、低盐清洗液和水;所述高盐清洗液含有40~60mM三羟甲基氨基甲烷和230~260 mM 氯化钠;所述低盐清洗液含有40~60 mM 碳酸氢铵;所述清洗的方法包括:依次使用所述高盐清洗液、低盐清洗液和水分别清洗1~3次;所述分离使用的洗脱液包括三氟乙酸溶液;所述三氟乙酸溶液的浓度为0.3v/v%~0.7v/v%。