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闽楠原生质体的制备方法及其在单细胞测序中的应用
申请人信息
- 申请人:江西省林业科学院
- 申请人地址:330032 江西省南昌市南昌经济开发区枫林西大街1629号
- 发明人: 江西省林业科学院
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 闽楠原生质体的制备方法及其在单细胞测序中的应用 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202410195408.2 |
| 申请日 | 2024/2/22 |
| 公告号 | CN117802030A |
| 公开日 | 2024/4/2 |
| IPC主分类号 | C12N5/04 |
| 权利人 | 江西省林业科学院 |
| 发明人 | 伍艳芳; 郑永杰; 刘新亮; 张月婷; 徐海宁; 涂白连; 戴小英; 温世钫; 郭捷 |
| 地址 | 江西省南昌市南昌经济开发区枫林西大街1629号 |
摘要文本
本发明提供了闽楠原生质体的制备方法及其在单细胞测序中的应用；本发明通过筛选得到了闽楠原生质体最佳制备方法，包括酶解液的组成、酶解时间及纯化时离心的条件等；同时本发明提供的方法制备的闽楠原生质体复合单细胞测序的条件，能够进行单细胞测序；本发明通过单细胞测序构建了闽楠原生质体的细胞图谱，可为樟科及其他木本植物分化发育研究提供全新的见解、思路；本发明提供的闽楠原生质体制备方法，改善了目前珍稀树木尚未公开原生质体制备方法的问题。
专利主权项内容
1.一种可用于单细胞测序的闽楠原生质体制备方法，其特征在于，包括以下步骤：使用酶解液酶解闽楠1-2月幼茎研磨液，制得闽楠原生质体粗液；所述酶解液包括0.5-0.7mol/L甘露醇、1-2％纤维素R-10、1-2％离析酶R-10；所述酶解时间为3-12h；将原生质体粗液过筛，并加入WB液，重悬并进行第一次离心；第一次离心完成后，弃上清，加入WB液，再重悬并进行第二次离心；第二次离心完成后，弃上清，加入WB液；重复所述第一次离心的步骤和第二次离心的步骤；最后一次离心完成后，弃上清液，加入WB液混匀，制得闽楠原生质体悬液。