本发明公开了一种奶牛金黄色葡萄球菌α‑溶血素亚单位疫苗的制备方法及应用。
目的在于提供预防或治疗奶牛金黄色葡萄球菌乳房炎的亚单位疫苗的制备方法,包括以下步骤:1)将金黄色葡萄球菌α‑溶血素蛋白的第37位的组氨酸定点突变为丙氨酸;2)将定点突变的α‑溶血素蛋白基因克隆到pET28a载体中;3)将步骤2)获得的表达载体转化E.coli BL21(DE3),诱导表达获得重组α‑溶血素蛋白;4)使用镍柱亲和层析和Resource S柱纯化步骤3)得到的重组α‑溶血素蛋白;5)将纯化得到的重组α‑溶血素蛋白与药学上可接受的佐剂充分混匀后得到奶牛金黄色葡萄球菌乳房炎重组亚单位疫苗。
钱泓 吴有强 宣春玲 查银河 贾宝琴 曹珊珊 陈藻
浙江海隆生物科技有限公司
312000 浙江省绍兴市滨海新城马欢路398号科创中心2号楼5楼
本发明公开了一种奶牛金黄色葡萄球菌α‑溶血素亚单位疫苗的制备方法及应用。
目的在于提供预防或治疗奶牛金黄色葡萄球菌乳房炎的亚单位疫苗的制备方法,包括以下步骤:1)将金黄色葡萄球菌α‑溶血素蛋白的第37位的组氨酸定点突变为丙氨酸;2)将定点突变的α‑溶血素蛋白基因克隆到pET28a载体中;3)将步骤2)获得的表达载体转化E.coli BL21(DE3),诱导表达获得重组α‑溶血素蛋白;4)使用镍柱亲和层析和Resource S柱纯化步骤3)得到的重组α‑溶血素蛋白;5)将纯化得到的重组α‑溶血素蛋白与药学上可接受的佐剂充分混匀后得到奶牛金黄色葡萄球菌乳房炎重组亚单位疫苗。