本发明公开了一种基于DNA的融合基因定量测序建库方法，步骤包括：1)基因组DNA片段化；2)DNA片段分选；3)单向特异性PCR扩增，获得带融合位点的扩增产物；4)在扩增产物序列的3’端连接单链通用文库接头序列；5)通用PCR扩增，富集融合基因区域片段，经纯化、定量，获得测序文库。
本发明还公开了通过上述方法构建DNA文库进行融合基因测序检测的方法、该方法的用途，以及用于上述建库方法的融合基因单向特异性引物组。
本发明通过单向特异性扩增DNA片段，捕获融合序列，再通过富集获得NGS测序用DNA文库，不仅提高了捕获的有效数据的比例，而且加快了建库和检测的速度，适合用于FFPE样本或液态活检。

王晨 王冠 戴春 朱沁 许强

领星生物科技（上海）有限公司

201203 上海市浦东新区自由贸易试验区芳春路400号1幢3层302-42室

本发明公开了一种基于DNA的融合基因定量测序建库方法，步骤包括：1)基因组DNA片段化；2)DNA片段分选；3)单向特异性PCR扩增，获得带融合位点的扩增产物；4)在扩增产物序列的3’端连接单链通用文库接头序列；5)通用PCR扩增，富集融合基因区域片段，经纯化、定量，获得测序文库。
本发明还公开了通过上述方法构建DNA文库进行融合基因测序检测的方法、该方法的用途，以及用于上述建库方法的融合基因单向特异性引物组。
本发明通过单向特异性扩增DNA片段，捕获融合序列，再通过富集获得NGS测序用DNA文库，不仅提高了捕获的有效数据的比例，而且加快了建库和检测的速度，适合用于FFPE样本或液态活检。