本发明公开了一种单链分子标签接头及单链DNA建库方法及其在检测循环肿瘤DNA中应用,单链分子标签接头,包括:14个碱基配对形成的茎结构、测序引物序列、和8个随机核苷酸组成的分子标签序列,其中测序引物序列与茎结构序列之间插入了一位碱基“U”,该单链核酸序列经退火变性会形成茎环结构;本发明通过单链DNA建库,解决现有检测技术中对液态活检特别是ctDNA片段短、浓度低、碎片化、灵敏度低技术问题;实现准确辨别基因组坐标始末位点相同的测序reads是来自同一还是多个原始细胞释放出来的cfDNA,并将来源于同一个细胞的原始正负链的测序reads配对起来分析的目的,从而降低测序的重复劳动,提高对假阳性突变的分辨率。
林志伟 莫凡 罗凯 郑文渊 韩宁 陈枢青
杭州纽安津生物科技有限公司
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本发明公开了一种单链分子标签接头及单链DNA建库方法及其在检测循环肿瘤DNA中应用,单链分子标签接头,包括:14个碱基配对形成的茎结构、测序引物序列、和8个随机核苷酸组成的分子标签序列,其中测序引物序列与茎结构序列之间插入了一位碱基“U”,该单链核酸序列经退火变性会形成茎环结构;本发明通过单链DNA建库,解决现有检测技术中对液态活检特别是ctDNA片段短、浓度低、碎片化、灵敏度低技术问题;实现准确辨别基因组坐标始末位点相同的测序reads是来自同一还是多个原始细胞释放出来的cfDNA,并将来源于同一个细胞的原始正负链的测序reads配对起来分析的目的,从而降低测序的重复劳动,提高对假阳性突变的分辨率。