本发明提供一种高通量测序文库的构建方法以及用于文库构建的试剂盒。
所述试剂盒包含如下成分中的至少一种：高通量测序Y型接头，用于单端线性PCR扩增的通用引物，用于单端线性多重PCR扩增的生物素标记特异性引物，正、反向文库扩增引物，UDG酶等。
基于该试剂盒构建靶向双分子标签(UMI分子标签和链特异性分子标签)高通量测序文库的方法。
本方法在基于多重PCR扩增的靶向测序体系中实现了随机分子标签UMI和序列多态性的链特异性分子标签双重纠错机制的同时，规避了绝大多数常规多重PCR扩增靶向测序体系的弊端，从而摒除了突变检测中的一切假阳性和假阴性，可对样品中的低频核酸突变进行高灵敏度，精准度以及高深度的检测。

王洋 闫通帅 罗镓超

福州福瑞医学检验实验室有限公司

350011 福建省福州市晋安区新店镇猫岭路9号C区厂房9#厂房4F

本发明提供一种高通量测序文库的构建方法以及用于文库构建的试剂盒。
所述试剂盒包含如下成分中的至少一种：高通量测序Y型接头，用于单端线性PCR扩增的通用引物，用于单端线性多重PCR扩增的生物素标记特异性引物，正、反向文库扩增引物，UDG酶等。
基于该试剂盒构建靶向双分子标签(UMI分子标签和链特异性分子标签)高通量测序文库的方法。
本方法在基于多重PCR扩增的靶向测序体系中实现了随机分子标签UMI和序列多态性的链特异性分子标签双重纠错机制的同时，规避了绝大多数常规多重PCR扩增靶向测序体系的弊端，从而摒除了突变检测中的一切假阳性和假阴性，可对样品中的低频核酸突变进行高灵敏度，精准度以及高深度的检测。