一种细胞储存介质及储存方法
摘要文本
本发明提出了一种细胞储存介质及储存方法,属于细胞储存技术领域。将海藻糖与二酸酐反应后制得羧基化海藻糖,分液与脯氨酸和维生素C反应,产物加入大豆卵磷脂、胆固醇中,制备脯氨酸‑海藻糖/维生素C‑海藻糖混合脂质体,与甜菜碱、β‑烟酰胺单核苷酸、亚精胺、海藻糖、甘油、HEPES缓冲溶液混合均匀,制得细胞储存介质。本发明制得的细胞储存介质对脂肪间充质干细胞具有很好的低温保护作用,能够明显改善单独添加海藻糖的效果,有一定的渗透性,减少胞内冰晶形成从而减少细胞损伤,同时安全无毒,能够促进干细胞分化,提高干细胞存活率和干性,具有广阔的应用前景。。数据由马 克 团 队整理
申请人信息
- 申请人:北京青藤谷禧干细胞科技研究院有限公司
- 申请人地址:100093 北京市海淀区瀚河园26号楼3层02
- 发明人: 北京青藤谷禧干细胞科技研究院有限公司
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种细胞储存介质及储存方法 |
| 专利类型 | 发明授权 |
| 申请号 | CN202311799067.1 |
| 申请日 | 2023/12/26 |
| 公告号 | CN117481109B |
| 公开日 | 2024/3/12 |
| IPC主分类号 | A01N1/02 |
| 权利人 | 北京青藤谷禧干细胞科技研究院有限公司 |
| 发明人 | 王壮; 雷起凤; 尹娜; 梁玉倩; 杨俊丽 |
| 地址 | 北京市海淀区瀚河园26号楼3层02 |
专利主权项内容
1.一种细胞储存介质的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1.羧基化海藻糖的制备:将海藻糖与二酸酐在碱的存在下反应,制得羧基化海藻糖;S2.脯氨酸-海藻糖的制备:将脯氨酸和步骤S1制得的羧基化海藻糖在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基琥珀酰亚胺的存在下反应,制得脯氨酸-海藻糖;S3.氯化海藻糖的制备:将海藻糖与二氯亚砜反应,制得氯化海藻糖;S4.维生素C-海藻糖的制备:将步骤S3制得的氯化海藻糖与维生素C在碱的存在下反应,制得维生素C-海藻糖;S5.脯氨酸-海藻糖/维生素C-海藻糖混合脂质体的制备:将步骤S2制得的脯氨酸-海藻糖、步骤S4制得的维生素C-海藻糖与大豆卵磷脂、胆固醇溶于溶剂中,混合均匀,减压旋蒸挥发溶剂,然后加入HEPES缓冲溶液,加热水合,超声,微孔滤膜过滤,制得脯氨酸-海藻糖/维生素C-海藻糖混合脂质体;S6.活性剂的制备:将甜菜碱、β-烟酰胺单核苷酸、亚精胺混合均匀,制得活性剂;S7.细胞储存介质的制备:将步骤S5制得的脯氨酸-海藻糖/维生素C-海藻糖混合脂质体、步骤S6制得的活性剂、海藻糖、甘油、HEPES缓冲溶液混合均匀,制得细胞储存介质。