靶向目的基因FISH荧光探针及其自组装放大探针系统

专利主权项内容

1.靶向目的基因FISH荧光探针，其特征在于，该荧光探针称为靶向目的基因FISH荧光探针X，所述FISH荧光探针X中间是长度15-65bp的靶向目的基因的线性探针序列，所述线性探针序列左右两端分别连接一个长度5-35bp的颈环序列，当所述线性探针序列与所述靶向目的基因结合时，所述颈环序列形成颈环结构；所述颈环序列在所述线性探针序列左右两端分别形成颈环结构，左右两端颈环序列可以是相同的颈环序列或不同的颈环序列；在每个所述颈环序列末端引入作为RNA酶切割位点的RNA碱基，和在两端的RNA碱基末端分别连接有封闭序列，所述封闭序列长度为5-30bp，左右两端的封闭序列与左右两端的线性探针序列分别特异性结合，所述封闭序列与所述线性探针序列特异性结合后Tm值比所述线性探针序列与所述靶向目的基因特异性结合后Tm值低至少5℃；所述线性探针序列标记了用于FISH荧光检测的荧光基团，标记的荧光基团不影响所述线性探针序列与目的基因特异性结合；所述封闭序列在其游离端标记荧光淬灭基团，所述荧光淬灭基团在所述封闭序列与所述线性探针序列结合的情况下淬灭所述线性探针序列上的荧光基团，从而减少所述FISH荧光探针在未有效结合目的基因时的背景荧光；杂交检测时，所述线性探针序列与所述目的基因结合，左右两端的颈环结构打开，每端的封闭序列与每端的线性探针序列特异性结合也断开，通过加入RNA酶切割所述RNA酶切割位点，释放所述封闭序列，所述荧光淬灭基团不再对所述线性探针序列上的荧光基团具有淬灭作用。