← 返回列表

一种高通量筛选Cbl-b抑制剂的方法及其应用

申请号: CN202311814081.4
申请人: 北京爱思益普生物科技股份有限公司
申请日期: 2023/12/27

摘要文本

本发明涉及生物医药技术领域,尤其涉及一种高通量筛选Cbl‑b抑制剂的方法及其应用,包括以下步骤:S1、将泛素偶联酶包被在酶标板中;S2、向酶标板中加入不同浓度的Cbl‑b抑制剂后,再加入生物素标记的Cbl‑b;S3、向酶标板中加入SRC‑Zap70融合蛋白和三磷酸腺苷;S4、向酶标板中加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素;S5、向酶标板中加入化学发光底物,通过酶标仪读取化学发光信号值,并通过化学发光信号值拟合得到Cbl‑b抑制剂的IC50值。本发明的方法可实现Cbl‑b抑制剂的高通量筛选,反应灵敏度高,使用蛋白浓度低且信噪比高,大大降低化合物的检测限,能够检测到更加有潜力的Cbl‑b抑制剂。

专利详细信息

项目 内容
专利名称 一种高通量筛选Cbl-b抑制剂的方法及其应用
专利类型 发明授权
申请号 CN202311814081.4
申请日 2023/12/27
公告号 CN117471106B
公开日 2024/3/12
IPC主分类号 G01N33/68
权利人 北京爱思益普生物科技股份有限公司
发明人 李涛; 夏强; 张璐; 邴铁军; 李英骥
地址 北京市大兴区经济技术开发区科创十三街18号院16号楼1层101

专利主权项内容

1.一种高通量筛选Cbl-b抑制剂的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、将泛素偶联酶包被在酶标板中;所述的泛素偶联酶为UbcH5b重组人泛素偶联酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示;S2、向酶标板中加入不同浓度的Cbl-b抑制剂后,再加入生物素标记的Cbl-b;S3、向酶标板中加入SRC-Zap70融合蛋白和三磷酸腺苷;所述的SRC-Zap70融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;S4、向酶标板中加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素;S5、向酶标板中加入化学发光底物,通过酶标仪读取化学发光信号值,并通过化学发光信号值拟合,得到Cbl-b抑制剂的IC值。50