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人乳头病毒16型E7蛋白的制备及其应用
摘要文本
本发明公开了人乳头病毒16型E7蛋白的制备及其应用，涉及生物领域。本发明联合GST标签和6×His标签作为人乳头病毒16型E7蛋白的纯化标签，提高了可溶性目的蛋白的纯化效率，通过GST纯化和镍柱纯化的方法对目的蛋白进行提纯，采用远超于正常洗脱体积的低浓度咪唑进行洗杂，避免或减少了GST标签非特异性结合镍柱较强难以去除的问题，使其目的蛋白的纯度达到90％以上，为检测血浆中的抗HPV 16 E7的抗体奠定了基础，节约了实验成本。 更多数据：
申请人信息
- 申请人:四川大学华西医院
- 申请人地址:610000 四川省成都市武侯区国学巷37号
- 发明人: 四川大学华西医院
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 人乳头病毒16型E7蛋白的制备及其应用 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311405252.8 |
| 申请日 | 2023/10/26 |
| 公告号 | CN117447561A |
| 公开日 | 2024/1/26 |
| IPC主分类号 | C07K14/025 |
| 权利人 | 四川大学华西医院 |
| 发明人 | 任建君; 赵宇; 江传欢; 宋瑶; 邱轲; 吴思思; 彭星辰; 毛敏姿; 冯兰; 饶郁芳 |
| 地址 | 四川省成都市武侯区国学巷37号 |
专利主权项内容
1.一种人乳头病毒16型E7蛋白的制备方法，其特征在于，其包括：对含有GST标签、人乳头病毒16型E7重组蛋白的核苷酸序列和His标签的表达载体进行诱导表达，获得表达产物；对所述表达产物进行GST柱纯化、GST标签切除和镍柱纯化，以获得融合有His标签的人乳头病毒16型E7重组蛋白；其中，所述镍柱纯化包括：平衡、洗杂和洗脱；所述洗杂采用的洗杂液包括10mM～80mM的咪唑，洗杂液的洗杂体积≥柱体积的100倍。