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一种提高丙酮酸脱羧酶SsPDC在大肠杆菌中可溶性表达的方法
摘要文本
本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种提高丙酮酸脱羧酶SsPDC在大肠杆菌中可溶性表达的方法。本发明是以聚集抗性蛋白SlyD为融合标签,通过引入SlyD融合标签来提高SsPDC蛋白的可溶性表达量,具体是在SsPDC序列的N端加上一个融合标签SlyD序列构建新的质粒SlyD‑SsPDC,得到新的质粒后,重新在大肠杆菌中进行转化表达。本发明通过增加一个融合标签SlyD,使SsPDC在大肠杆菌中的蛋白表达量极大提升,有效提高了蛋白的可溶性表达,同时也解决了包涵体表达的难题。
申请人信息
- 申请人:山东理工大学
- 申请人地址:255000 山东省淄博市张店区新村西路266号
- 发明人: 山东理工大学
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种提高丙酮酸脱羧酶SsPDC在大肠杆菌中可溶性表达的方法 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311839813.5 |
| 申请日 | 2023/12/29 |
| 公告号 | CN117551678A |
| 公开日 | 2024/2/13 |
| IPC主分类号 | C12N15/70 |
| 权利人 | 山东理工大学 |
| 发明人 | 魏浩; 张同; 马志鑫; 周梓萱; 刘悦欣; 张豪杰; 高秀珍; 马钦元 |
| 地址 | 山东省淄博市高新技术产业开发区高创园A座313室 |
专利主权项内容
1.一种提高丙酮酸脱羧酶SsPDC在大肠杆菌中可溶性表达的方法,其特征在于,以聚集抗性蛋白SlyD为融合标签,以大肠杆菌基因组为模板扩增SlyD基因片段,以同源重组的方式连接至pET28a-SsPDC上,构成SlyD-SsPDC重组质粒,此重组质粒即为pET28a-SlyD-SsPDC原核表达载体,将该原核表达载体导入大肠杆菌表达系统中得重组菌,诱导表达SlyD-SsPDC蛋白。。来自马克数据网