一种在鸡原代肌内脂肪细胞中稳定过表达的CX3CL1慢病毒重组载体的构建方法及应用

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本发明属于分子生物学技术领域，涉及一种在鸡原代肌内脂肪细胞中稳定过表达的CX3CL1慢病毒重组载体的构建方法及应用；构建方法：将CX3CL1基因全长CDS扩增产物与LV5载体分别进行酶切并进行连接，将连接产物转化到感受态细胞，将CX3CL1基因表达载体质粒进行超纯抽提，将抽取的质粒进行包装，将包装好质粒与其共转染到细胞，进行慢病毒的包装、收集，进行滴度检测；本发明通过构建CX3CL1过表达的慢病毒载体，显著提高了原代肌内脂肪细胞的转染效率，大大增加了CX3CL1基因整合到肌内脂肪细胞基因组的概率，并快速构建了CX3CL1高水平体外表达模型，有效获得了与肌内脂肪沉积相关的功能基因的分子标记。