一种产L-色氨酸菌株的高通量筛选方法

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本发明公开了一种产L‑色氨酸菌株的高通量筛选方法。本发明通过将产L‑色氨酸菌株的发酵液和M9培养基去培养一个指示菌株(指示菌株为含有表达质粒pSC101‑Ptac5‑7‑sfgfp的Escherichia coli BL21(DE3) : ΔtrpR)，载体pSC101‑Ptac5‑7‑sfgfp上包含阻遏蛋白TrpR；该阻遏蛋白和两分子的L‑色氨酸结合，然后与杂合启动子Ptac5‑7上的trpO8序列结合，从而抑制下游基因的表达；绿色荧光基因sfgfp，用来产生荧光；以及杂合启动子Ptac5‑7用来表达sfgfp基因。本发明还设计并构建了一种响应L‑色氨酸的杂合启动子Ptac5‑7，在0～5g/L的L‑色氨酸浓度范围内，随着L‑色氨酸浓度的增加，该杂合启动子Ptac5‑7的表达强度逐渐减弱。