高产可溶性β-1, 3-葡聚糖的根瘤菌基因工程改造及双阶段发酵方法

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本发明公开了高产可溶性β‑1, 3‑葡聚糖的根瘤菌基因工程改造及双阶段发酵方法，属于微生物基因工程技术领域。本发明基于菌株ZB01，发掘到能够四个可以明显影响β‑1, 3‑葡聚糖产量的基因，其中gluA表达与β‑1, 3‑葡聚糖产量呈现负相关而gluN表达与β‑1, 3‑葡聚糖产量呈现正相关趋势。通过敲除gluA以及过表达gluN，获得基因工程菌株；针对产物粘稠带来的传质阻力以及生长抑制问题，设计双阶段发酵体系(先生长后促进合成)，即在菌株进入对数期末期添加诱导剂IPTG，使得β‑1, 3‑葡聚糖的产量达到6.62g/L，有效解决了可溶性β‑1, 3‑葡聚糖产量低的难题，为其工业化生产奠定了基础。