一种高效分泌表达人骨桥蛋白的毕赤酵母及其构建和应用

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本发明公开了一种高效分泌表达人骨桥蛋白的毕赤酵母及其构建和应用。首先通过构建杂合信号肽表达质粒引导OPN表达分泌，确定了一种能够有效的提高OPN的表达量的方法，摇瓶发酵产量为45.4mg/L；其次，对分子伴侣蛋白和转录因子进行筛选，在毕赤酵母中共表达，进行摇瓶发酵验证。取发酵液的上清液进行Western Blot和ELISA验证，发现胞外能够检测到OPN产量达到80.4mg/L，相较于原始菌株提升了2.5倍。本发明的毕赤酵母工程菌不仅解决了人骨桥蛋白在毕赤酵母中大量表达易出现错误折叠、引起细胞分泌系统崩溃的问题，促进了OPN在毕赤酵母中正确折叠并能够快速分泌到细胞外，还实现了目前OPN产量的最高水平，具有重大工业应用潜力。