← 返回列表
基于磁分离的3D-DNA步行器适配体传感器及克罗诺杆菌检测方法
摘要文本
本发明公开了一种基于磁分离的3D‑DNA步行器适配体传感器及克罗诺杆菌检测方法，属于生物检测技术领域。本发明以适配体作为克罗诺杆菌属的识别分子，使用的适配体稳定性高、制备成本低、易于标记，对克罗诺杆菌属具有高度亲和力和高度选择性。通过高选择性适配体修饰的MNPs识别并分离靶标与带有荧光标记的信号探针的AuNPs轨道连接起来，从而促进信号快速累积。本发明的方法可以应用于克罗诺杆菌属所有种属菌检测中，且能够不依赖传统的蛋白酶的特异性酶切作用，有效提高了传感器的稳定性，避免了环境因素波动对传感器性能的影响。利用本发明的方法能够实现对阪崎克罗诺杆菌的高灵敏检测，其检测限可达到1.6CFU/mL。 数据由马 克 团 队整理
申请人信息
- 申请人:江南大学
- 申请人地址:214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号
- 发明人: 江南大学
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 基于磁分离的3D-DNA步行器适配体传感器及克罗诺杆菌检测方法 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311030583.8 |
| 申请日 | 2023/8/16 |
| 公告号 | CN117434263A |
| 公开日 | 2024/1/23 |
| IPC主分类号 | G01N33/569 |
| 权利人 | 江南大学 |
| 发明人 | 王周平; 杨宁茹; 齐硕; 丁宁 |
| 地址 | 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号 |
专利主权项内容
1.一种克罗诺杆菌检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、将连接有第一序列的克罗诺杆菌适配体与连接有第二序列的脱氧核酶孵育，形成杂交双链，将该杂交双链中的克罗诺杆菌适配体与磁性分离介质亲和连接，得到偶联产物；S2、将不同浓度克罗诺杆菌的样品与S1得到的偶联产物共孵育，再进行磁分离，取上清；S3、将S2得到的上清与含有连接底物链的金纳米颗粒的体系共孵育进行酶切反应，反应结束后检测荧光强度；S4、建立荧光强度与克罗诺杆菌浓度之间的关系曲线；S5、将待检测样品按照S1-S3步骤进行操作，测定出荧光强度，根据S4步骤荧光强度与克罗诺杆菌浓度之间的关系曲线，计算出待检测样品中的克罗诺杆菌的含量；其中，所述第一序列与脱氧核酶部分互补，第二序列与克罗诺杆菌适配体部分互补，底物链远离金纳米颗粒的一端修饰有荧光基团，且该底物链可被脱氧核酶特异性切割，含有连接底物链的金纳米颗粒的体系中包含催化离子。