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一种多重PCR结合分子标签测序文库的构建方法
摘要文本
本发明公开了一种多重PCR结合分子标签测序文库的构建方法，属于生物技术领域。UMI序列引入对引物自身二级结构的影响，扩增引物较长的情况下，再加上引入UMI的随机碱基序列，使得引物序列更为复杂，容易形成二级结构影响扩增效果，多重体系里面引物间的干扰更加明显。本发明通过引入反向互补序列，使引物自发的形成颈环结构，避免了随机碱基带来的影响。同时，颈环结构的设计不仅减少了引物二级结构，更减少了不同引物之间的相互干扰，可实现1000重以上的PCR扩增。本发明所开发的多重PCR结合UMI的测序文库构建技术，具有操作简单、样本投入量少、超多重PCR建库、低频突变的检测、兼容多测序平台等优势。
申请人信息
- 申请人:苏州朔幸医学检验有限公司
- 申请人地址:215000 江苏省苏州市相城区经济技术开发区澄阳街道康元路777号1号楼厂房四层
- 发明人: 苏州朔幸医学检验有限公司
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种多重PCR结合分子标签测序文库的构建方法 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311672410.6 |
| 申请日 | 2023/12/7 |
| 公告号 | CN117625788A |
| 公开日 | 2024/3/1 |
| IPC主分类号 | C12Q1/6886 |
| 权利人 | 苏州朔幸医学检验有限公司 |
| 发明人 | 陈志宏; 许金添; 肖冰; 陈琰 |
| 地址 | 江苏省苏州市相城区经济技术开发区澄阳街道康元路777号1号楼厂房四层 |
专利主权项内容
1.一种基于多重PCR结合分子标签测序的肿瘤基因检测引物，其特征在于，包括特异性修饰引物和接头扩增引物；所述特异性修饰引物的序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.86所示；所述特异性修饰引物上游引物(F)的5端还要添加序列如SEQ ID NO.87所示的“F-tag”序列，所述特异性修饰引物下游引物(R)的5端还要添加序列如SEQ ID NO.88所示的“R-tag”序列；所述接头扩增引物的序列如SEQ ID NO.89～SEQ ID NO.89所示。