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一种抑制残留AAV载体质粒和质粒骨架转录活性的方法
摘要文本
本发明提供了一种抑制残留AAV载体质粒和质粒骨架转录活性的方法。具体的，本发明提供了一种包含转录抑制元件的核酸构建体，其中所述转录抑制元件通过抑制AAV载体质粒中ITR的转录活性，用于抑制AAV载体质粒残留和质粒骨架反向包装所产生的转录产物。还提供了包含所述核酸构建体的重组AAV载体质粒，以及使用所述重组AAV载体质粒制备得到的AAV产品。本发明从根源上解决了AAV产品中的质粒残留和质粒反向包装导致的非特异转录以及未知转录产物的翻译带来的安全性风险。。
申请人信息
- 申请人:苏州新芽基因生物技术有限公司
- 申请人地址:215000 江苏省苏州市中国(江苏)自由贸易试验区苏州片区苏州工业园区星湖街218号生物医药产业园A2楼427单元
- 发明人: 苏州新芽基因生物技术有限公司
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种抑制残留AAV载体质粒和质粒骨架转录活性的方法 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311738959.0 |
| 申请日 | 2023/12/18 |
| 公告号 | CN117701638A |
| 公开日 | 2024/3/15 |
| IPC主分类号 | C12N15/864 |
| 权利人 | 苏州新芽基因生物技术有限公司 |
| 发明人 | 何春艳; 栗凤鹏; 马云飞 |
| 地址 | 江苏省苏州市中国(江苏)自由贸易试验区苏州片区苏州工业园区星湖街218号生物医药产业园A2楼427单元 |
专利主权项内容
1.一种核酸构建体，其特征在于，所述核酸构建体包含转录抑制元件，所述转录抑制元件通过抑制AAV载体质粒中ITR的转录活性，用于抑制AAV载体质粒残留和质粒骨架反向包装所产生的转录产物；所述核酸构建体具有如下式I所示的结构(5'端至3'端)：Y1-5'ITR-Y2-Z1-Y3-3'ITR-Y4(I)式中，Y1，Y2，Y3，Y4各自独立地为无或转录抑制元件，且Y1，Y2，Y3，Y4不同时为无；其中，Y2和Y4为正向的转录抑制元件，Y1和Y3为反向的转录抑制元件，所述反向的转录抑制元件为所述正向的转录抑制元件的反向互补序列；Z1为目的基因(GOI)表达盒，其包括一个或多个启动子序列和一个或多个目的基因编码序列；“-”各自独立地为连接序列，其中，“Y1-5'ITR-Y2”和“Y3-3'ITR-Y4”区段中所述连接序列的长度为0-150nt，优选地，0-100nt；其中，所述转录抑制元件选自下组：(a)含发夹结构的序列；(b)polyA signal加尾信号序列；(c)含有终止密码子的polyA signal加尾信号序列；(d)多聚腺苷酸序列，即PolyA序列；(e)含有终止密码子的多聚腺苷酸序列；或其组合。