一种基于肺炎链球菌的生物杂合自由基发生器的制备方法及应用
摘要文本
本发明涉及基于肺炎链球菌的生物杂合自由基发生器的制备方法及应用，可不受肿瘤乏氧限制持续产生高活性的•OH高效杀伤肿瘤，其解决的技术方案是，包括以下步骤：1)制备叠氮修饰的肺炎链球菌S.pn‑N3；2)制备炔基修饰的Fe3O4纳米颗粒Fe3O4‑DBCO；3)制备基于肺炎链球菌的生物杂合自由基发生器Fe3O4@S.pn；本发明方法操作方便，稳定可靠，所制得的肿瘤生物杂合自由基发生器具有选择性高、持续高效等优势，在肿瘤治疗方面可突破肿瘤乏氧微环境限制选择性持续产生高活性•OH，提高肿瘤治疗效果，是肿瘤治疗药物上的创新。。关注微信公众号专利查询网
申请人信息
- 申请人:郑州大学
- 申请人地址:450001 河南省郑州市高新技术开发区科学大道100号
- 发明人: 郑州大学
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种基于肺炎链球菌的生物杂合自由基发生器的制备方法及应用 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311581244.9 |
| 申请日 | 2023/11/23 |
| 公告号 | CN117599085A |
| 公开日 | 2024/2/27 |
| IPC主分类号 | A61K33/26 |
| 权利人 | 郑州大学 |
| 发明人 | 刘军杰; 王琼微; 赵秀; 张振中 |
| 地址 | 河南省郑州市高新区科学大道100号 |
专利主权项内容
1. 一种基于肺炎链球菌的生物杂合自由基发生器的制备方法，其特征在于，首先分别在S.pn和FeO表面修饰叠氮基团N和DBCO，通过N与DBCO的炔基发生点击化学反应，即得生物杂合自由基发生器，具体包括以下步骤：34331)制备叠氮修饰的肺炎链球菌S.pn-N3培养S.pn 8-10h，用新鲜配置的THB培养基+5%胎牛血清扩大培养10倍，培养3-5h，培养结束后，6000g离心5-10min 收集细胞，并重悬于含有4-6mM H-D-DAP (N)·HCL的新鲜THB培养基或新鲜THB培养基+5%胎牛血清中继续培养60-80min，然后6000g离心5-10min收集细胞，并用PBS缓冲液洗涤细胞2次，得叠氮修饰的肺炎链球菌S.pn-N；332)制备炔基修饰的FeO纳米颗粒FeO-DBCO3434将10-40mg DSPE-PEG2000-DBCO溶解于2-8mL氯仿中，超声5-10min，然后转移到干燥的玻璃圆底烧瓶中；随后，将5-20mg油酸包覆的FeO纳米粒溶于1-4mL氯仿，将FeO溶液加入DSPE-PEG2000-DBCO溶液中，超声混合5-10min后将上述玻璃圆底烧瓶55℃旋蒸至溶剂完全蒸干，加入5-20mL超纯水超声20-30min，获得FeO-DBCO纳米粒；3434343)制备基于肺炎链球菌的生物杂合自由基发生器FeO@S.pn34将步骤1)制备的S.pn-N细胞重悬于步骤2)制备的3-12 mL浓度为50-200μg/mL的FeO-DBCO制剂体系中孵育3-5h，随后，取200μL生物正交后的菌液，4000rpm，4℃，离心3-5min，弃去上清，PBS洗涤2次后重悬于3-12mL PBS中，得基于肺炎链球菌的生物杂合自由基发生器。334