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一种分离辣椒果实原生质体的方法
摘要文本
本发明公开了一种分离辣椒果实原生质体的方法,包括取成熟期辣椒果实,将所述辣椒果实切片得到待分离果实薄片;将所述待分离果实薄片在25℃避光酶解,在摇床上摇动4‑5h,加入W5溶液终止酶解反应并继续摇50‑60min得到原生质体液,对酶解后的所述原生质体液进行过滤,将过滤后的所述原生质体液水平离心5min,去上清。在所述原生质体液加入MMG溶液,然后将其混匀后静置后得到分离后的原生质体。本发明提供的分离辣椒果实原生质体的方法,其具有操作简便,使用终止酶解反应提高了原生质体的游离效率,节省了成本;分离与纯化效果好,不同品种的辣椒果实原生质体都能够得到有效的分离。
申请人信息
- 申请人:中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所
- 申请人地址:571700 海南省海口市龙华区学院路4号热科院品资所
- 发明人: 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种分离辣椒果实原生质体的方法 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311816781.7 |
| 申请日 | 2023/12/27 |
| 公告号 | CN117535221A |
| 公开日 | 2024/2/9 |
| IPC主分类号 | C12N5/04 |
| 权利人 | 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 |
| 发明人 | 秦于玲; 刘维侠; 刘子记; 曹振木; 朱丹; 殷晓敏 |
| 地址 | 海南省海口市龙华区学院路4号热科院品资所 |
专利主权项内容
1.一种分离辣椒果实原生质体的方法,其特征在于:包括如下步骤:A取成熟期辣椒果实,将所述辣椒果实切片得到待分离果实薄片;B将所述待分离果实薄片在25℃避光酶解,在摇床上摇动4-5h,加入W5溶液终止酶解反应并继续摇50-60min得到原生质体液,所述酶解溶液包括MES缓冲液,甘露醇,KCl,CaCl,纤维素酶R10,离析酶R10,果胶酶;2C对酶解后的所述原生质体液进行过滤,所述过滤的滤网为100μm;D将过滤后的所述原生质体液水平离心5min,去上清;E在所述原生质体液加入MMG溶液,然后将其混匀后静置后得到分离后的原生质体。