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一种新的菠萝高效遗传转化方法
摘要文本
本发明提供了一种新的菠萝高效遗传转化方法，诱导出菠萝愈伤后，暗培养增殖，再继续暗培养，通过暗培养诱导菠萝愈伤组织不定芽分化，使莲座状的丛生芽抽生茎秆，再按节切段(1节/段)作为受体材料进行农杆菌侵染，经再分化和筛选获得转基因植株，显著提高了菠萝农杆菌介导转化效率，PCR检测遗传转化植株阳性率能够达到41.51％，显著高于现有的方法的阳性率，在菠萝规模化转基因实践中具有广泛的应用前景。
申请人信息
- 申请人:中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所; 华南农业大学
- 申请人地址:571101 海南省海口市龙华区学院路4号
- 发明人: 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所; 华南农业大学
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种新的菠萝高效遗传转化方法 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202310467676.0 |
| 申请日 | 2023/4/26 |
| 公告号 | CN117604027A |
| 公开日 | 2024/2/27 |
| IPC主分类号 | C12N15/84 |
| 权利人 | 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所; 华南农业大学 |
| 发明人 | 栾爱萍; 吴竞; 何业华; 张伟; 贺军虎; 钟紫钟; 易文; 杨明哲 |
| 地址 | 海南省海口市龙华区学院路4号; 广东省广州市天河区五山华南农业大学 |
专利主权项内容
1.一种菠萝高效遗传转化方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)愈伤组织诱导：诱导出菠萝非胚性愈伤组织，然后暗培养增殖；(2)茎组织培养：继续暗培养，直至在菠萝愈伤上生出茎秆；(3)植株转化：以菠萝茎秆的节点为切口处横切菠萝秆茎，将其分为几段，产生伤口，然后采用活化的转基因农杆菌侵染；(4)筛选培养：将侵染后菠萝秆茎段接种在含不同浓度Km的培养基中进行多轮筛选，最后将抗性芽转移至生根培养基进行生根培养；(5)炼苗移栽，得到正常生长菠萝苗；(6)PCR阳性检测。