一种用于室温检测RNA的组合物及试剂盒
摘要文本
本发明公开了一种用于室温检测RNA的组合物及试剂盒，该组合物包括：目标RNA的反转录引物和反转录酶，用于合成目标RNA的反向互补序列，反转录引物的长度为10～20个核苷酸；RPA反向引物、RPA正向引物、重组酶、DNA聚合酶、T7RNA聚合酶，用于扩增目标RNA的双链DNA扩增子，并以双链DNA扩增子为底物合成包含目标RNA的反向互补序列的长链RNA；双链DNA扩增子由目标RNA及其反向互补序列碱基互补配对形成，RPA反向引物的5’端包含T7RNA聚合酶启动子序列；Cas13a蛋白及其crRNA，crRNA用于靶向识别目标RNA的反向互补序列，Cas13a蛋白用于切割目标RNA的反向互补序列；TaqMan荧光探针，其能在目标RNA的反向互补序列被切割时被Cas13a蛋白非特异切割，释放荧光基团。该组合物能在20℃、30min内检测到0.5cp/μL的目标RNA。 www.macrodatas.cn
申请人信息
- 申请人:武汉大学
- 申请人地址:430000 湖北省武汉市武昌区珞珈山
- 发明人: 武汉大学
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种用于室温检测RNA的组合物及试剂盒 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311783425.X |
| 申请日 | 2023/12/22 |
| 公告号 | CN117737208A |
| 公开日 | 2024/3/22 |
| IPC主分类号 | C12Q1/6844 |
| 权利人 | 武汉大学 |
| 发明人 | 殷昊; 佟晓晗; 张楹; 张坤; 李天乐 |
| 地址 | 湖北省武汉市武昌区珞珈山 |
专利主权项内容
1.一种用于室温检测RNA的组合物，其特征在于，包括：目标RNA的反转录引物和反转录酶，用于合成目标RNA的反向互补序列，所述反转录引物的长度为10～20个核苷酸；RPA反向引物、RPA正向引物、重组酶、DNA聚合酶、T7 RNA聚合酶，用于扩增目标RNA的双链DNA扩增子，并以双链DNA扩增子为底物合成包含目标RNA的反向互补序列的长链RNA；所述双链DNA扩增子由目标RNA及其反向互补序列碱基互补配对形成，RPA反向引物的5’端包含T7 RNA聚合酶启动子序列；Cas13a蛋白及其crRNA，所述crRNA用于靶向识别目标RNA的反向互补序列，所述Cas13a蛋白用于切割目标RNA的反向互补序列；TaqMan荧光探针，其能在目标RNA的反向互补序列被切割时被Cas13a蛋白非特异切割，释放荧光基团。 （macrodatas.cn） （来 自 马 克 数 据 网）