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一种包载中药的肿瘤细胞外囊泡及其制备方法
摘要文本
本发明涉及一种包载中药的肿瘤细胞外囊泡及其制备方法，本发明的方法包括以下步骤：1、培养贴壁肺癌细胞系；2、采用梯度离心法收取肿瘤细胞外囊泡；3、将肿瘤细胞外囊泡与黄连素按质量比1 : 2配制电穿孔体系，采用离心法收集包载黄连素的肿瘤细胞外囊泡。由于间接载药的直接孵育法并不适用溶解度极低的黄连素，因此，本发明选择电穿孔法包载黄连素到肿瘤细胞外囊泡。同时，确定囊泡/黄连素不同质量配比条件下的载药效率，证明新技术路线能合成合格的EV‑Ber，并且确定了载药效率最高的囊泡/黄连素质量配比。
申请人信息
- 申请人:华中科技大学同济医学院附属协和医院
- 申请人地址:430022 湖北省武汉市解放大道1277号协和医院
- 发明人: 华中科技大学同济医学院附属协和医院
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种包载中药的肿瘤细胞外囊泡及其制备方法 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311487093.0 |
| 申请日 | 2023/11/9 |
| 公告号 | CN117582415A |
| 公开日 | 2024/2/23 |
| IPC主分类号 | A61K9/50 |
| 权利人 | 华中科技大学同济医学院附属协和医院 |
| 发明人 | 金阳; 邓晶晶; 况文龙; 陈文娟 |
| 地址 | 湖北省武汉市江汉区解放大道1277号 |
专利主权项内容
1.一种包载中药的肿瘤细胞外囊泡的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、将贴壁肺癌细胞系培养至90％密度时，将上清换为无血清基础培养基，紫外照射细胞30分钟，然后将细胞放置于37℃的CO培养箱中继续培养24小时；2步骤2、采用梯度离心法收取肿瘤细胞外囊泡；步骤3、将肿瘤细胞外囊泡与黄连素按质量比1 : 2配制电穿孔体系，黄连素为25mM的二甲基亚砜溶液，肿瘤细胞囊泡与黄连素混合后，用冷PBS定容后，用移液枪吹打混匀后移至电击杯，冰上预冷整个体系5分钟；电击一次后，将电击杯放在37℃培养箱孵育30分钟以恢复囊泡膜完整性，用移液枪将体系溶液完全吸到EP管，采用离心法收集包载黄连素的肿瘤细胞外囊泡。。关注公众号马克数据网