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一种5-氨基乙酰丙酸高产菌的高通量筛选系统、方法及其应用
申请人信息
- 申请人:山东大学
- 申请人地址:266237 山东省青岛市即墨滨海路72号
- 发明人: 山东大学
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种5-氨基乙酰丙酸高产菌的高通量筛选系统、方法及其应用 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202211730317.1 |
| 申请日 | 2022/12/30 |
| 公告号 | CN117701480A |
| 公开日 | 2024/3/15 |
| IPC主分类号 | C12N1/21 |
| 权利人 | 山东大学 |
| 发明人 | 王倩; 祁庆生; 王琦 |
| 地址 | 山东省济南市历城区山大南路27号 |
摘要文本
本发明属于合成生物学及微生物代谢工程技术领域，具体涉及一种5‑氨基乙酰丙酸高产菌的高通量筛选系统、方法及其应用。本发明通过研究发现，5‑氨基乙酰丙酸(ALA)以剂量依赖性的方式导致更高水平的氧化应激，而ALA引起的氧化应激降低了大肠杆菌的细胞内cAMP水平。基于此，本发明构建具有不同动力学范围的cAMP响应启动子，并在此基础上建立了ALA高产菌株的高通量筛选系统。本发明使用该系统通过荧光激活细胞分选(FACS)筛选两条ALA生产途径(C4途径和C5途径)中的酶高产突变体，并成功地筛选出了ALA生产途径酶的优秀突变体菌株，因此具有良好的实际应用之价值。
专利主权项内容
1.一种5-氨基乙酰丙酸高产菌的高通量筛选系统，其特征在于，所述高通量筛选系统至少包括对5-氨基乙酰丙酸响应的cAMP、cAMP受体蛋白CRP、以及受CRP调控的启动子和报告基因，其中，所述报告基因位于启动子的下游并受到所述启动子的调控。