基于多通道拉曼探针肿瘤MSI错配修复蛋白的检测方法
申请人信息
- 申请人:中国科学院烟台海岸带研究所
- 申请人地址:264003 山东省烟台市莱山区春晖路17号
- 发明人: 中国科学院烟台海岸带研究所
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 基于多通道拉曼探针肿瘤MSI错配修复蛋白的检测方法 |
| 专利类型 | 发明授权 |
| 申请号 | CN202311837005.5 |
| 申请日 | 2023/12/28 |
| 公告号 | CN117471101B |
| 公开日 | 2024/3/12 |
| IPC主分类号 | G01N33/577 |
| 权利人 | 中国科学院烟台海岸带研究所 |
| 发明人 | 李进; 陈令新 |
| 地址 | 山东省烟台市莱山区春晖路17号 |
摘要文本
本发明公开了一种基于多通道拉曼探针肿瘤MSI错配修复蛋白的检测方法，属于蛋白检测技术领域。该检测方法包括以下步骤：(1)将多通道拉曼分子SEE、STE、SPE和MDBM组装成O‑GERTs；(2)选取针对MLH1、MSH2、MSH6和PMS2靶向的单克隆抗体对O‑GERTs进行修饰；(3)用抗体修饰后的拉曼探针对错配修复蛋白进行正交缝隙增强拉曼检测。本发明的有益之处在于：本发明提供的检测方法通过使用一组多通道O‑GERTs，可以实现单次对MLH1、MSH2、MSH6和PMS2四种错配修复蛋白同时进行检测，极大提升了检测效率和精度。
专利主权项内容
1.一种基于多通道拉曼探针肿瘤MSI错配修复蛋白的检测方法，所述肿瘤为结直肠癌，所述错配修复蛋白为MLH1、MSH2、MSH6和PMS2，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、将多通道拉曼分子组装成O-GERTs：(1)将多通道拉曼分子SEE、STE、SPE和MDBM单层附着在金核上，分别得到SEE改性的金核溶液、STE改性的金核溶液、SPE改性的金核溶液和MDBM改性的金核溶液，所述SEE、STE、SPE和MDBM分别是S-(4-乙基苯基)乙硫醇、S-(4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯基)乙硫醇、S-(4-(苯乙炔基)苯基)乙硫醇和2-巯基-4, 5, 6, 7-d4-苯并咪唑的缩写；(2)将金壳生长到改性的金核上形成核壳结构O-GERTs，分别得到SEE O-GERTs、STE O-GERTs、SPE O-GERTs和MDBM O-GERTs；步骤2、用抗体修饰O-GERTs：选取针对MLH1、MSH2、MSH6和PMS2靶向的单克隆抗体对SEE O-GERTs、STE O-GERTs、SPEO-GERTs和MDBM O-GERTs进行修饰，分别得到SEE O-GERTs@MLH1、STE O-GERTs@MSH2、SPEO-GERTs@MSH6 和 MDBM O-GERTs@PMS2；步骤3、用抗体修饰后的拉曼探针对错配修复蛋白进行检测：将SEE O-GERTs@MLH1、STE O-GERTs@MSH2、SPE O-GERTs@MSH6 和 MDBM O-GERTs@PMS2混合，得到混合O-GERTs，用混合O-GERTs在室温下对肿瘤组织切片进行孵育染色，用拉曼光谱检测仪采用流线高速采集模式对染色后的肿瘤组织切片进行正交缝隙增强拉曼检测。