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一种从Trizol样品中快速提取适用于高通量测序的DNA的方法
申请人信息
- 申请人:嘉应学院; 中山大学
- 申请人地址:514000 广东省梅州市东郊梅子岗
- 发明人: 嘉应学院; 中山大学
专利详细信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 专利名称 | 一种从Trizol样品中快速提取适用于高通量测序的DNA的方法 |
| 专利类型 | 发明申请 |
| 申请号 | CN202311435835.5 |
| 申请日 | 2023/11/1 |
| 公告号 | CN117625740A |
| 公开日 | 2024/3/1 |
| IPC主分类号 | C12Q1/6806 |
| 权利人 | 嘉应学院; 中山大学 |
| 发明人 | 纪静芸; 骆观正; 陈伟庭; 任泽慧 |
| 地址 | 广东省梅州市梅松路; 广东省广州市海珠区新港西路135号 |
摘要文本
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种从Trizol样品中快速提取适用于高通量测序的DNA的方法。具体包括如下步骤：对获取含DNA的间层/有机层的Trizol匀浆通过乙醇沉淀及润洗、NaOH溶解，得到中和后溶液；向所得溶液中加入蛋白酶K，经水浴消化得反应液；向反应液中加入DNA结合液，再加入异丙醇，混匀，加入纯化柱，离心；向纯化柱中加入DNA漂洗液，离心；向纯化柱中加入水洗脱、静置、离心，得到DNA样品。本发明通过高浓度蛋白酶K消化DNA粗产物并开发与之兼容的高效便捷的核酸硅胶柱回收体系，实现了兼容深度测序的高质量高纯度DNA的分离纯化，建立了适用于核酸质谱检测及高通量测序的即用DNA材料制备的方法。。来自专利查询网
专利主权项内容
1.一种从Trizol样品中快速提取适用于高通量测序的DNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)使用Trizol裂解组织样品得到Trizol匀浆，向分离除去RNA水相后的间相/有机层中加入乙醇，混匀，离心，得沉淀；(2)向步骤(1)所得沉淀中加入洗涤液进行润洗，得沉淀；(3)向步骤(2)所得沉淀中加入NaOH溶液，重悬沉淀，再加入Hepes缓冲液，中和所得溶液；(4)向步骤(3)所得溶液中加入蛋白酶K，水浴，得到反应液；(5)向步骤(4)所得反应液中加入DNA结合液，再加入异丙醇，混匀，置于硅质纯化柱中，离心除去滤液；(6)向步骤(5)的纯化柱中加入DNA漂洗液，离心除去滤液；(7)向步骤(6)的纯化柱中加入水洗脱，静置，离心，得到DNA样品。 百度搜索马 克 数 据 网